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【金秋计划】菌种保藏的常用方法汇总

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    2024/09/06
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常用设备综合讨论

  • 菌种保藏的常用方法汇总

    方法1:甘油保菌法。
    适用范围:菌种的中长期保藏,保藏时间可在1年以上。
    操作方法:由于甘油本身十分粘稠,很难定量,因此一般将甘油和水按1:1的比例配成终浓度为50%的甘油溶液,进行灭菌处理。使用时,按50%甘油:菌液=1:1的比例混合,使甘油终浓度在20-30%即可,甘油浓度过高或过低都不利于菌种保藏。再将甘油菌种转移至-80℃冰箱长期冻存。
    优点:此方法适用范围广,操作简单,保藏期长,菌种不容易发生变异。
    方法2:斜面保菌法。
    适用范围:菌种的短期保藏。
    操作方法:将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后转移至4℃冰箱中保藏。保藏的时间根据微生物的种类而不同,一般霉菌、放线菌及产芽孢的细菌保存2-4个月就需要移种一次,酵母菌为两个月,而细菌最好一个月移种一次。
    优点:操作简单,使用方便,不需特殊设备,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异或污染杂菌等。缺点:保藏期短,菌种容易变异,且染菌几率较高。
    方法3:穿刺保菌法。
    适用范围:菌种的短期保藏。
    操作方法:准备一管半固体培养基,用接种针挑取菌种,自半固体培养基的中心垂直刺入,直至接近试管底部,但不要穿透,然后沿原穿刺线将接种针退出,于4℃冰箱保存。此方法同斜面保菌法一样需要定期移种。
    方法4:沙土保菌法。
    适用范围:菌种的中长期保藏。
    操作方法:将培养好的菌种与无菌沙土混合,使菌体吸附在沙土载体上,干燥后转移至4℃冰箱保存。需要取用菌种的时候,取出少量沙土颗粒即可。
    优点:操作简单,菌种的保藏时间长。
    方法5:冷冻干燥法。
    适用范围:菌种的长期保藏。
    操作方法:将菌种冷冻,在减压条件下,利用升华作用去除其中水分,使细胞的生理活动趋于停止,从而使菌种长期维持存活的状态。需要取用菌种时,用无菌水或培养基重悬菌体,将菌悬液转移至固体培养基平板上进行培养。
    优点:适用于菌种的长期保存,但是相关的设备和操作相对其他几种保藏方法较复杂。
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