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【金秋计划】实验室常用微生物接种方法汇总
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2024/09/06
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常用设备综合讨论
接种方法1:划线法。
适用范围:用于菌种分离纯化,获得单菌落。
操作方法:接种环蘸取少量待分离样品,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线合适的话,经培养后,可得到单菌落。
优点:可以观察菌落特征,对混合菌进行分离。缺点:不能进行菌落计数。
接种方法2:涂布法。
适用范围:用于菌落计数。
操作方法:先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,然后用无菌吸管吸取0.1mL菌液接种在已凝固的琼脂平板上。再用无菌涂布棒将菌液在平板上涂抹均匀,将涂布好的平板静置30min,使菌液渗透至培养基内,然后将平板倒转,过夜培养,至长出菌落后即可计数。
优点:可以计数,观察菌落特征。缺点:接种前需梯度稀释,吸收量较少,操作繁琐,平板不干燥效果不好,容易蔓延。
接种方法3:倾倒法。
适用范围:用于菌落计数。
操作方法:吸取1mL菌液加入平板中,倒入已融化并冷却至45~50℃的细菌培养基,轻轻转动平板,使菌液与培养基混合均匀,冷疑后倒置,过夜培养,至长出菌落后即可计数。
优点:可以计数,较方便。缺点:接种前需梯度稀释,不能观察菌落特征。
接种方法4:斜面法。
适用范围:用于菌种保藏。
操作方法:用接种环或接种针伸入菌种管内,挑取适量菌落。伸入斜面培养管内,先从斜面底部到顶端拖一条接种线,再自下而上蜿蜒划线,或直接自下而上地蜿蜒划线。接种完成之后,用火焰灭菌培养管口,并塞上棉塞,适温培养。
接种方法5:液体培养基法。
适用范围:用于菌液比浊实验。
操作方法:用无菌接种环挑取菌落或标本,在试管内壁与液面交界处轻轻研磨,使细菌均匀得散落在液体培养基中进行适温培养。
接种方法6:螺旋法。
适用范围:用于菌落计数。
操作方法:对数减少的样品容量以阿基米德螺旋线的形式被自动分注在旋转式培养基表面。培养基上每一点的容量可以被知晓和校准。菌液的浓度可以通过培养皿上一定区域的菌落数量除以同区域样品分注量来计算。
优点:菌液无需稀释,自动化接种,效率高,可节省实验耗材和时间。缺点:实验成本较高,适用于样品量较大的实验。
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