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【金秋计划】体外抑菌试验整理汇总
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2024/09/06
私聊
常用设备综合讨论
抑菌试验1:平板计数法。
操作方法:取一定量的稀释样品涂布在平板上,形成肉眼可见的单菌落,并统计单菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。通过与组内或组间比较,从而得到样品对待测菌株的抗菌性能。
适用范围:
①固体类:薄膜、金属块、镀膜玻璃等,要求测试面积大于等于1.5×1.5cm,大于该面积按照比例添加菌液。
②液体类:样品量根据测试时样本的溶剂和浓度而定,浓度由样品特性及实验目的而定,一般不超过菌液的10%。
结果判定:进行3个重复实验计算平均值。
抑菌试验2:抑菌圈实验。
操作方法:抑菌圈实验是测定抗菌性能常用实验方法,主要用于测定样品对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用。主要方法:K-B法、打孔法和牛津杯法。
适用范围:
①固体类:薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等。制样要求:金属块、凝胶类样本须制备成统一大小的圆形。布料、纸片类样本可裁剪为圆形。若样品太脆无法裁剪,可称取相应质量样品,用PBS浸泡过夜,制备成圆形药敏片。
②液体类:根据测试时样本浓度而定,一般为1 mL/种菌。
③粉末类:使用打孔器进行打孔,用粉末填充满所打的孔中,一般最少需要1g粉末样品。
结果判定:每个抑菌圈测量三次计算平均值。
抑菌试验3:OD值测定。
操作方法:将待测样品与菌液共培养后,细菌生长的培养液浊度与细菌浓度成正比,使用紫外分光光度计测定培养液的OD值。
适用范围:
①固体类:薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等。
②液体类:要求样本溶液无色或者淡色。
结果判定:绘制生长时间与OD值的生长曲线图,每个点测量3次OD值。
抑菌试验4:MIC值。
操作方法:最低抑菌浓度(MIC):能够抑制培养基内细菌生长的最低药物浓度。
适用范围:
①液体类:样品溶液需完全溶解且无色或者淡色,使用微孔板法。
②粉末类:粉末必须可溶,根据CLSI标准,最大母液浓度512ug/ml。
结果判定:MIC结果为肉眼可见无细菌生长的最小浓度,需进行三次重复实验。
实验需要注意:
①培养基配置:要求培养基灭菌温度不宜过高,培养基含糖量也不能太高,否则会导致焦化,影响实验结果判断;
②一般常规菌株,不耐药,不需要设置抗生素对照组。
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