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【金秋计划】+基线波动影响样品测试,如何排查??

  • memory光阴
    2024/09/13
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 1、液相系统没有平衡好,柱子里的流动相一直在变化,导致基线波动;

    2、没有脱气机的仪器,当流动相未脱气或脱气未彻底时,基线会出现尖刺峰;

    3、当色谱柱被污染时,也会造成基线波动;

    4、检测器的流通池被污染,造成吸收的不恒定,此时需要清洗流通池;

    5、检测器灯能量不足时,吸收会变得不稳定,这时基线一般也不稳定,特别是在低波长处尤为明显;

    6、当使用低波长检测时,有时流动相会使用两相或以上的等度,这时混合器的很小的混合比例的误差都会被放大,很有可能会使基线发生波动;

    7、流动相里的有机相的截止波长最好要小于检测波长20nm以上;

    8、实验室环境不稳定(比如温度忽高忽低,气流不断变化等);

    9、仪器出现问题也会造成基线波动,这种情况下通常也会出现压力不稳。比如流动相过滤头堵塞、入口主动阀滤芯污染、单向阀被污染物堵塞、泵头有气泡、系统流路漏液,比如管路裂开、peek接头没完全连上色谱柱而导致的泄露等。
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  • 礼夏

    第1楼2024/09/14

    – mobile phase A: acetonitrile R, 3.8 g/L solution of
    ammonium acetate R (20:80 V/V);
    – mobile phase B: acetonitrile R;
    Time
    (min)
    A B
    0 - 15 95 5
    15 - 35 95 → 20 5 → 80
    35 - 45 20 80

    最近在做EP11的一个梯度洗脱,在30分钟流动相B到70 时就会开始产生杂乱的峰(其他方法不会有,并且重复进样出峰位置和峰高相同),目标杂质刚好在39分钟,虽然已经是超纯水和HPLC色谱级,推测还是流动相中有杂质,在梯度洗脱时前期乙腈少,导致杂质在柱中停留,在乙腈浓度开始提高时又逐渐洗脱出来。
    这种情况下可以调整梯度让杂峰消失吗,或者是思路方向有问题,不是流动相导致的?

    请教一下各位老师应该怎么解决这个问题

    图上除了39分钟以外都是杂峰,每针都有

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