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如何绘制二硫腙比色法测定食品中微量元素的标准曲线

哪吒走中路

2024/10/02
小电子

原创大赛公告

如何绘制二硫腙比色法测定食品中微量元素的标准曲线
一、准备工作
- 试剂与仪器
  - 首先，要准备好标准微量元素溶液。这就好比我们有了不同刻度的尺子，用来确定微量元素的量。例如，如果要测定铅元素，就准备已知准确浓度的铅标准溶液。同时，还需要二硫腙溶液，这是能和微量元素发生反应显色的关键试剂。另外，缓冲溶液也不能少，它可以调节溶液的酸碱度，因为反应对酸碱度有要求。还有，要准备好干净的比色管、移液管和分光光度计等仪器。
- 标准溶液浓度系列
  - 接下来，我们要配制一系列不同浓度的标准微量元素溶液。比如，我们可以取适量的原始标准溶液，用合适的溶剂（像蒸馏水之类的）进行稀释。例如，配制浓度为 0 微克 / 毫升、0.1 微克 / 毫升、0.2 微克 / 毫升、0.3 微克 / 毫升、0.4 微克 / 毫升、0.5 微克 / 毫升的铅标准溶液。这一步就像是准备了不同重量的砝码，用来做比较。
二、反应操作
- 加样到比色管
  - 拿几个干净的比色管，分别标记好。然后用移液管准确地吸取不同浓度的标准溶液，比如说每个比色管里都加入 10 毫升的标准溶液。这就像是给不同的杯子里倒入不同量的水，但这里是不同浓度的微量元素溶液。
- 调节酸碱度
  - 在每个比色管里加入适量的缓冲溶液，来调节溶液的 pH 值。不同的微量元素测定可能要求不同的 pH 值。以铅元素为例，可能需要把 pH 值调节到 8 - 9 左右。这一步很重要，就像厨师做菜要控制好火候一样，酸碱度不合适会影响后面的反应。调节的时候要慢慢加缓冲溶液，边加边用 pH 试纸或者 pH 计测量，确保达到合适的 pH 值。
- 加入二硫腙溶液并反应
  - 接着，向每个比色管里加入等量的二硫腙溶液，比如每个比色管加入 2 毫升。然后把比色管的塞子盖好，轻轻地摇晃比色管，让溶液充分混合均匀，使微量元素和二硫腙充分反应。反应的时间可以根据实际情况，一般摇晃几分钟就可以了。这个过程就像是把颜料和水混合，让它们发生作用。
三、测量与绘制曲线
- 测量吸光度
  - 反应完成后，把比色管里的溶液倒入比色皿中。先把分光光度计的波长调节到合适的值（这个波长是根据微量元素和二硫腙反应的特性确定的，比如测定铅时波长可能是 510nm）。然后用空白溶液（就是浓度为 0 微克 / 毫升的标准溶液反应后的溶液）对比色光度计进行调零。之后，依次把其他比色皿中的溶液放入分光光度计中，测量它们的吸光度。
- 绘制标准曲线
  - 最后，我们把测得的吸光度数据和对应的标准溶液浓度整理出来。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，在坐标纸上或者用绘图软件画出这些点，然后用直线把这些点连接起来。这样，一条标准曲线就绘制完成了。这条曲线就像一把尺子，以后我们测量食品中的微量元素含量时，只要测出吸光度，就可以根据这条曲线算出微量元素的浓度了。

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