仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
生命科学仪器综合讨论
>
帖子详情
C57小鼠左肺原位种植成瘤实验
Ins_564515b5
2024/10/08
私聊
生命科学仪器综合讨论
C57
小鼠左肺原位种植成瘤实验
细胞准备:
1.
按照正常传代过程,收集、离心、吹散,制成细胞悬液
2.
细胞计数板计数细胞悬液的细胞浓度
3.
含
matrigel
胶的细胞悬液制备原则:
1.
每只
C57
小鼠原位注射
20ul
的含
matrigel
胶的细胞悬液
2.
细胞悬液与
matrigel
体积比为
1
:1
,即全部需要的细胞数量均包含于细胞悬液中,然后与等体积的
matrigel
胶均匀混合
3.
在节约实验成本的前提下,为保证实验顺利进行,一般含
m
atrigel
胶的细胞悬液均按照实际需要量的
2
倍进行准备
4.
根据
含
matrigel
胶的细胞悬液制备原则及实际需要原位注射的小鼠数量和细胞数量,制备相应的含
matrigel
胶的细胞悬液
5.
以注射
5
只
C57
小鼠,每只小鼠注射
1
x10
5
细胞为例:根据细胞计数板计数的细胞浓度,适当稀释或者浓缩细胞悬液,配制细胞浓度为
1x10
7
cells/ml
的细胞悬液,取上述细胞悬液
100ul
,使用预冷的枪头的
EP
管,将该
100
ul
细胞悬液与
100ul matrigel
胶在冰上均匀混合,得到共
200ul
的含
matrigel
胶的浓度为
5x10
3
cells/ul
的细胞悬液,每只
C57
小鼠注射
20ul
,即
1x10
5
cells
,细胞悬液共
200ul
,为实际需要量的
2
倍
6.
冰上保存制好的细胞悬液,尽快进行小鼠原位种植
原位种植实验操作:
1.
实验操作台及相关实验物品的准备,实验器械的消毒酒精棉球擦拭消毒
2.
使用预先、新近配置的
1%
的戊巴比妥溶液,每只
C57
小鼠按照
10
ul/g
的量进行腹腔注射,用以麻醉小鼠,一只体重
20g
的
C57
小鼠需要腹腔注射
200
ul
浓度为
1%
的戊巴比妥溶液
3.
约
3
分钟之后,
C7
小鼠进入麻醉状态,准备进行实验
4.
在清洁、消毒过的试验操作台或木板上,纵向、左胸侧向外、头朝上尾朝下放置麻醉状态的
C57
小鼠,使用蘸有
75%
消毒酒精的棉团轻轻擦拭小鼠左胸外侧
5.
使用眼科剪,在
C57
小鼠左胸外侧正中线、左前肢下方、左胸腔肋骨上缘处做纵向开口,长度约
0.5cm
,深度为剪开胸腔外侧平滑肌层,不可过深至胸腔内,不可过浅至皮肤真皮层
6.
使用眼科镊轻轻拨开剪口并上下移动,查找小鼠心肺交界,确定入针点
7.
使用
1ml
注射器吸取含
m
atrigel
胶的细胞悬液,排尽注射器内空气,在确定的入针点进针,进针深度约
0.5cm
,根据针头触感确定是否进针入肺实质
8.
轻轻推送
20ul
含
m
atrigel
胶的细胞悬液,停针静止约
5s
后轻轻拔出注射器
9.
使用手术缝针缝合小鼠左胸外侧切口
10.
将小鼠放回饲养笼内,检查饲料及饮水,在鼠笼标签做好完整的相关实验标记,将鼠笼放回原处
相关话题
1
下周直播:拉曼光谱在生物医药领域的应用——第六届拉曼光谱网络会议
2
96孔板单克隆成球分析
近期热榜
迎国庆送壕礼!十月发帖抢大疆云台
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
喜迎国庆!第十七届原创大赛超级原创日参赛奖励翻倍
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
热门活动
【售后专场--招聘会】
第三届微课大赛投票进行中ing
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【原创】分享一本电子书-The Physical Basis of Chemistry
2007/10/14
血型鉴定-最简单的免疫试验
第六届原创
2011/11/28
急救示波器检定规程
2006/03/10
【求助】葡萄糖氧化酶传感器在血液中测试响应下降问题``
2008/12/29
【原创】18F-FDG及应用
2010/06/18
【转帖】美科学家研制出遗忘药丸 可删除痛苦记忆
2010/11/25
【原创】【第三届原创大赛发奖】gl19860312请进
2010/12/28
三大因素引爆全球生物仿制药市场
转帖
2013/09/24
下周直播:拉曼光谱在生物医药领域的应用——第六届拉曼光谱网络会议
分享
2024/10/09
96孔板单克隆成球分析
第十七届原创
2024/10/08
C57小鼠左肺原位种植成瘤实验
第十七届原创
2024/10/08
细胞CCK-8增殖分析(反映群体细胞的生长)
第十七届原创
2024/10/08
医疗仪器的革新:守护生命的科技力量
分享
2024/09/19
仪器的魅力:科技探索与精准控制的基石
分享
2024/09/19
Tigergene动物实验用颅钻
原创
2024/09/16
全光谱流式细胞仪原理,可以帮忙解答一下吗
原创
2024/09/09
用实力证明 - 技术人员能力好坏“我说行就行”的时代过去了?
第十七届原创
2024/10/02
同一个部门的人进门还让登记,宝宝很生气!
第十七届原创
2024/10/03
要想新员工学的快,培训技巧很重要!
第十七届原创
2024/10/04
【仪器心得】TDU2第二套热脱附使用心得
第十七届原创
2024/10/02
新人一般多长时间可以参加能力验证啊?
求助
2024/10/04
求助 ISO8361-1 ISO8361-2 ISO161 ISO4065 ISO10837 ISO7686 ISO11922等 标准
求助
2024/10/03
想建立一个只有10平米的小型恒温恒湿实验室大约需要多少费用?
求助
2024/10/04
【仪器心得】MPS robotic pro自动进样平台使用心得
第十七届原创
2024/10/03
细胞CCK-8增殖分析(反映群体细胞的生长)
第十七届原创
2024/10/08
PCR实验及数据分析和DNA电泳protocol
第十七届原创
2024/10/08
RNA提取及逆转录protocol
第十七届原创
2024/10/08
节后犯困吗
原创
2024/10/08
孔板琼脂成球分析(反映单个细胞的生长)
第十七届原创
2024/10/08
【仪器心得】岛津VOC-1000F 便携式非甲烷总烃分析仪使用心得
第十七届原创
2024/10/08
western blot protocol(蛋白凝胶电泳实验)
第十七届原创
2024/10/08
裸鼠皮下成瘤实验
第十七届原创
2024/10/08
品牌合作伙伴
丹纳赫苏州基地 打工人的梦想
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...