【原创】［胖记原创］液相色谱仪的维护与保养

二． 漏气

漏液是从内部向外漏，而漏气则是外部的气体进入液相色谱仪的流路内部形成了气泡。下面按流路的方向逐个部件分析产生气泡的原因和相应解决方法。

（1） 过滤头

抽液时，在流路管中有不规则但持续的小气泡产生，这时考虑的是流动相有没有脱气（需要特别提醒即使是有了真空脱气机也是要先超声脱气的，起码可以减少脱气机的工作压力并提高工作效率），如果已经脱了气，则要注意过滤头的污染也会造成这种现象。处理方法比较简单，拧下过滤头在稀硝酸中浸泡，超声半小时，洗净后装回去即可。

（2） 透明流路管

指的是在过滤头和输送泵之间的那一段管路。这一个部分往往不是有点气泡，而经常是整个管中全是空气而操作人员却浑然不知，以致输送泵工作了半天才发现流动相瓶里的液体一点也没少。这也是我们常说的液相色谱仪至少一周要开机一次的原因（我们做液相一定要有“微渗”的概念）。如果长时间不用，这一段管路的液体会彻底干掉，而充满空气的管路和充满液体的管路不仔细看是分辨不出的。

这种情况对于输送泵很危险，因为泵从设计来说是输送液体而不是气体，内部的液体对于活塞来说起到了机油的作用，如果活塞杆上还残存了一些缓冲盐，则极易拉伤，造成不可逆转的影响。

对于这种情况，要突出“预防为主”如：，液相色谱使用人员要相对固定和稳定，工作中合理搭配资源，每台机一周击至少作一次实验，如长期不用起码每周要冲流动相2 小时。养成良好的工作习惯很重要。

如果不慎出现了这种问题怎么办？我的建议是用外力使管路中充满液体。具体如下：

1、 找到流路管进入输送泵的接头。

2、 拧下来。

3、 用一干净的洗耳球的尖端对准管路的平整切口。

4、 吸液体，看液面从流动相瓶里上升，至离洗耳球5 厘米左右时停止该动作。

5、快速把接头拧回输送泵上（这个过程可能会有少许流动相外泄，这是正常现象）。

6、 开机，打开排液阀门，启动输送泵。

7、等排液管中流出的溶液没有气泡时，再关闭排液阀，仪器正常工作。

（3） 输送泵和柱子

这些部分进了气泡一般不怕，冲掉就行。

（4） 检测器

应该说，整个流路中只要有一个气泡都会在检测器上得到强烈的信号反映，检测器内部的气泡一般都能被冲走，但也有很难冲掉的残留气泡的情况。

如果检测器里有残留气泡，会有特征明显的表现形式，就是在走基线时会时不时间隔出现直上直下信号很大的信号峰。这时先看普通流量能否冲走，如果冲不走，那唯一的办法就是拆柱，把检测器直接连到输送泵的出口，加大几倍流量冲洗，则肯定能冲走气泡。

抽滤的代价没有那么高：
一台国产真空泵：1500元，可以使用n年；
一套国产抽滤瓶：250元，仔细用的话怎么也得用它个三二年吧；
0.22um、0.45um抽滤膜，济南就有，一盒200张100元，也挺好用的。

国产的东西应该会便宜很多倍。。。

只是我手头全是进口的，MILLIPORE的过滤器加上WATERS的过滤膜。。上次看了表感觉是真鬼贵、、、、

不过想想还是不太愿意敢用国产货，我这里5%的国产设备占了我90%的维修量。。。。以前还买点国产试剂，吃过几次亏后，全换成进口的了。。。

早搞怕了。。

外资公司或省站里，有钱部门，用起来当然不心疼了，我们小家小业的，不节约点用，试剂也想用分析纯的才行，色谱纯的贵了，用到工业企业检验，是有点偏高了，只能以大局（成本）为重了。

也作过很多，但是真没想过柱堵塞的原因是细菌，只是感觉柱压升高，是逐渐的，所以也没有注意，就以为样品或是流动相过滤不好引起的。很受教育。辛苦了，谢谢！

基本上出堵问题的大多是细菌，尤其在南方。。。

不过这也是当年付出了两根柱子的代价才知道的。。

一个有经验的液相工作者，　是用柱子堆出来的。。

仪器全靠保养，HPLC经常出现的问题就像楼主说的“细菌”。。。纯水，特别夏天容易涨菌，导致堵塞管路或色谱柱。。。建议所有流动相在使用前，必须过滤。。。。。

我是北方的，而且每天使用仪器都是换新水的，另外每次试验用的甲醇和水都经过过滤，细菌问题应该不是柱压升高的主要原因吧？我做试验时已经是很注意了。

怎么样才能赚积分啊