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【资料】Agilent 1200 现场培训材料

  • 熊猫宝宝
    2008/07/03
  • 私聊

液相色谱(LC)

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  • 熊猫宝宝

    第2楼2008/07/03

    (二)数据采集方法编辑:

    1、开始编辑完整方法:
    ● 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…” 项,如下图所示选中除“数据分析 ”外的三项,点击“确定”,进入下一画面。



    2、方法信息:
    ● 在“方法注释”中加入方法的信息(如:测试方法)。
    ● 点击 “确定”, 进入下一画面。




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    第3楼2008/07/03

    3、泵参数设定:(以四元泵为例)
    ● 在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂 B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入 ”一行“时间表” ,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
    ● 点击“确定”,进入下一画面。



    4、自动进样器参数设定:(以标准G1313为例)
    ● 选择合适的进样方式, 如图所示,进样体积 5.0ul ,洗瓶位置为6号。“标准进样”----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。“使用进样器程序”---可以点击“编辑” 按钮进行进样程序编辑。
    ● 点击进“确定”,进入下一画面。



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    第4楼2008/07/03

    5、柱温箱参数设定:
    ● 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如:40度。并选中它,点击“更多>>” 键,如图所示,选中“与左侧相同”,使柱温箱的温度左右一致。
    ● 点击“确定”,进入下一画面。



    6、VWD检测器参数设定:
    ● 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。
    ● 在“时间表” 中可以“插入”一行,输入随时间切换的波长,如1min ,波长=300nm。点击“确定”,进入下一画面。





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    第5楼2008/07/03

    7、    RID检测器参数设定:
    ● 色谱条件:
    进样体积: 20ul 。 光学单元温度: “关闭” 。
    极性: “正极性” 。 峰宽(响应时间) : 4s 。
    ● 如图所示: “光学部件温度”---若环境温度控制在±2℃,设定为“关闭”, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“峰宽 (响应时间)”---大多数分析设为“ 4s” ,只有在高速分析下设为更短。“分析后自动循环”---在不进行分析时可以让流动相循环,节省流动相,检测器连续运行,可随时投入使用。
    ● ***** 点击RID图标,选择RID Control :Heater 设为On,若要循环流动相,必须将“Recycling Valve”设为ON。手动purge 参比池,将其设为On,并输入Purge 时间。







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    第6楼2008/07/03

    8、    在“ 运行时选项表 ”中选中“ 数据采集”,点击“确定”。



    9、    点击“方法”菜单,选中“方法另存为…”,输入一方法名,如“测试”,点击“确定”。
    10、    从菜单 “视图”中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后点击“改变…” 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。(如同时检测二个信号,则重复10,选中“信号窗口2”。


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  • 熊猫宝宝

    第7楼2008/07/03

    11、    从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项,如下图所示,输入操作者名称,如“安装工程师”;在“数据文件 ”中选择“手动”或“前缀/计数器”。


    区别: 手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。 Pr—在前缀/计数器----“前缀”框中输入前缀,在“计数器”框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名,如vwd数据0001,vwd数据0002……。

    12、    点击“确定” ,从“仪器” 菜单选择“系统开启”。
    13、    等仪器准备好,基线平稳,从“运行控制”菜单中选择“运行方法”,进样。(若无自动进样器,则基线平稳后,进样并搬动手动进样阀,启动运行。)
    (DAD, VWD色谱图如下所示:)



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    第8楼2008/07/03

    (三)、数据分析方法编辑:
    1、    从“视图”菜单中,点击“数据分析”进入数据分析画面。
    2、    从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件名,如下图所示。点击“ 确定”,则数据被调出。



    3、    做谱图优化:
    从“图形”菜单中选择“信号选项”,如下图所示。从“范围” 中选择“满量程” 或“自动量程” 及合适的时间范围或选择“自定义量程” 调整。反复进行,直到图的比例合适为止。点击“ 确定”。



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    第9楼2008/07/03

    4、积分:
    ● 从“积分”菜单中选择“积分事件”选项,如下图所示。选择合适的“斜率灵敏度”
    ,“峰宽”,“最小峰面积”,“最小峰高”。
    ● 从“积分”菜单中选择“积分”选项, 则数据被积分。
    ● 如积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止。
    ● 点击左边“√”图标,将积分参数存入方法。

       
        5、打印报告:
        ● 从“报告”菜单中选择“设定报告”选项,进入如下图所示画面。
    ● 点击“定量结果”框中“计算”右侧的黑三角,选中“面积百分比”,其它选项不变。
    ● 点击“ 确定”。


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  • 熊猫宝宝

    第10楼2008/07/03

    (四)、关机:

    ● 关机前,先关灯,用相应的溶剂充分冲洗系统。
    ● 退出化学工作站,依提示关泵,及其它窗口,关闭计算机。
    ● 关闭Agilent 1200各模块电源开关。

    (五)、Agilent 1200 LC维护保养:
    1、    色谱柱长时间不用,存放时,柱内应充满溶剂,两端封死(如乙腈/甲醇适于反相色谱柱,正相色谱柱用相应的有机相)。
    2、    手动进样器,当使用缓冲溶液时,要用水冲洗进样口。
    3、流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。
    4、带seal-wash的 1200,要配制90%水+10%异丙醇,开启seal-wash清洗泵,溶剂不能干涸。
    5、注意事项见说明书,或由现场工程师介绍。

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