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DNA的快速电泳

tiandz

2005/03/21

生命科学仪器综合讨论

SuperBuffer(100X)简介

主要用途 DNA的快速电泳,取代传统的TAE和TBE。

产品介绍 SuperBuffer是一种革命性的超快高分辨核酸电泳液，由于其产热低,故可以以高达20-25V/cm的电压电泳,并且分辨率比传统电泳液更高。该产品能彻底替代TAE、TBE等传统DNA电泳液。

主要特点 1:快速
工作电压可高达20-25v/cm,比TAE和TBE的5-8V/cm(见分子克隆手册)高2-4倍，电泳时间只有使用TAE或TBE时的1/4。分辨率要求不高的定性检测(如PCR检测和酶切检测)可以在十分钟内完成。

2:高分辨
快速电泳防止了DNA的扩散,用0.5%的胶得到的电泳分辨率与用2-3%的胶(TAE或TBE电泳)得到的相当(效果图见www.tiandz.com网站相关内容)。

3.不影响后续的杂交,回收和连接等反应。

4.节约成本,0.5-1%的胶适合于分离大小在100bp-50kb之间的DNA,不需要高浓度胶。本产品能反复使用数次。

5.销售价格与市售国产TBE更便宜，产品有粉剂、预配液两种规格供客户选择。

物理特性无色液体,4度或常温保存

二： SuperBuffer(100X)的使用
SuperBuffer(100X)必须在使用前用水稀释100倍,其后的使用方法跟TAE或TBE的使用完全一样。如果使用高电压则有以下建议。

1. 琼脂糖胶浓度
分离从100bp到50kb的DNA片段均可使用0.5-1%的胶并能得到较高的分辩率。使用SuperBuffer电泳时由于可以高压电泳,胶浓度似乎越低电泳效果越好,也许是因为电泳速度越快,小片段DNA的弥散现象越轻,速度对小片段DNA弥散的影响超过了胶浓度对它的影响,故不必靠高浓度的胶来提高分辨率。使用高浓度的胶反而会使电泳时间加长,得不偿失。

2. EB染色
如果使用20-25V/cm电压,最好不要把EB加入上样液中,否则EB很容易在高压下与DNA分离。建议在倒胶前将EB直接加入琼脂糖中, EB的最佳终浓度为0.4 -0.5μg /ml。原理上SuperBuffer与EB以外的其它核酸染料(如SYBR Green)兼容,但天泽基因暂时没有进行相关实验,有待用户自己实验验证。

3. 样品的离子强度
SuperBuffer比TAE和TBE对样品离子强度更敏感。如果待测样品(如酶切产物,PCR产物)的离子强度与DNA分子量对照(如DNA ladder)的离子强度不同,则离子强度低的泳动稍快,估算得到的DNA分子大小可能稍有误差。如果需要准确估计,建议电泳使分子量标准和待测样品的盐浓度一样（在分子量标准中加酶切或PCR缓冲液）。

4: 电泳液用量与电压的关系
如果电泳槽的容量在100-200ml左右的(迷你型电泳,电极距离10cm左右),可以使用200-250V电压进行电泳。电压如果超过20V/cm,则电泳时间不宜超过三十分钟 (在此电泳条件下，电泳三十分钟足够将0.1-5kb的DNA分开)。

如果电泳槽的容量为600ml或更大，22.5V/cm(按正负两极距离)电泳一小时以上一般没有任何问题。

5: SuperBuffer的重复使用
SuperBuffer缓冲液最多可重复使用4-5次左右（如果电泳槽的容量为600ml的话）；重复使用前最好将其搅拌混匀并放置片刻，以恢复其缓冲能力。随着重复使用次数增加，相同电压下DNA电泳速度会稍微加快，但分辨率变化不大。

6: 电流电压降低现象
若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象，请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限,如果有上限设置,需将其调高使之与电泳电压匹配。如果原因不明,请与仪器生产厂家联系。部分电泳仪器做最高使用电压为200V。

7: 与RNA变性胶, 碱变性胶,脉冲电泳和PAGE的兼容性
天泽基因没有进行相关兼容性实验。

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第2楼2006/05/23

就是电泳缓冲液吧,真的有那么好?

我们用的是TBE啊,如果真的有说的那么好,还真是可以考虑一下哦.

0

第3楼2006/05/23

麻烦楼主说清楚一点,怎么个联系法

0

第4楼2006/07/04

只能用4-5次？TAE可以用10几次。

我们也不会买配好的TAE，会自己配，更省钱。

你们不如公布配方，卖原料？

0

第7楼2006/07/16

我们用的是TBE啊,如果真的有说的那么好,还真是可以考虑一下哦.

0

第10楼2006/07/26

"DNA的快速电泳"是干什么用的，能测DNA结构吗？

0

第11楼2006/07/28

比TAE的电压高那么多吗？那胶不是很容易化？

0

第12楼2006/08/08

你也不说价钱？？？电泳缓冲液用TBE就行！

0

第13楼2006/09/11

如果要求不高
或者是针对大分子DNA的快速电泳
可以试用一些实验室的低密度多孔纳米材料
没有毒性——环境安全
极其快速，少至1～2min，多至7～8min

0

第14楼2006/09/29

配方卖不卖啊，多少钱呀？

0

第15楼2006/10/07

真的有这么好吗??
那我们倒要试一试啊!

0

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