【资料】请教关于梯度洗脱基线问题

xy200609 2008/08/21

这种情况很正常，梯度洗脱随着有机相的增大，会将流动相中有机杂质洗脱出来产生空白峰；如果水相不是用超纯水（包括缓冲盐不是用色谱纯），有机相不是用进口的，则系统空白峰会很多、很大、很杂，影响样品分析结果。特别紫外检测波长较低时（如190-210nm左右），空白峰干扰很明显，且基线漂移也很大。因此，建议流动相尽可能使用超纯水（如Millipore），有机相用进口的，试剂用色谱纯或高纯，这些对梯度分析较好，更会延长色谱柱的使用寿命。

欢迎光临iblog 2008/08/22

四楼说的没错，而且梯度洗脱中甲醇比乙腈基线漂移更明显，特别是检测波长比较低的时候。梯度洗脱中如果用到缓冲盐，需要注意：随着流动相中有机相比例的增加，要保证缓冲盐不能有析出。

cjf123 2008/08/23

建议把甲醇换成乙腈,甲醇的截止波长约为230nm左右,你用的波长为210nm,这样肯定基线波动很大了;另外建议初使条件下平衡的时间长点,特别是在有缓冲盐的情况下. 楼主所说的进空白有峰,如果对结果没什么影响的话(对你所需要的峰无多大干扰),不管它就是了; 检测器如果有气泡的话,会产生较尖锐的峰.