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【求助】请教HPLC 高手

  • shmily1173
    2008/09/11
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我用高效液相仪荧光检测硫酸新霉素,由于硫酸新霉素没有紫外吸收基团,我用的是国外的氯甲酸芴甲酯的衍生化试剂,结果每次衍生化试剂出峰时间都是3分钟左右,很稳定,可硫酸新霉素衍生化产物出峰时间总是不一致,一般在8-11分钟之间,有哪位高手做过麻烦给知道下,仪器是waters 2695,荧光仪是2475,急!急!急!
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  • dickwang2008

    第1楼2008/09/11

    你的仪器平衡时间足够长吗?还有流动相里面加的酸或者碱是什么。如果他的PH值容易变化,那么时间就是很容易飘移。

    shmily1173 发表:我用高效液相仪荧光检测硫酸新霉素,由于硫酸新霉素没有紫外吸收基团,我用的是国外的氯甲酸芴甲酯的衍生化试剂,结果每次衍生化试剂出峰时间都是3分钟左右,很稳定,可硫酸新霉素衍生化产物出峰时间总是不一致,一般在8-11分钟之间,有哪位高手做过麻烦给知道下,仪器是waters 2695,荧光仪是2475,急!急!急!

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  • qingqingcao

    第2楼2008/09/11

    因为是衍生化 时间不够。反应不完全。加长反应管长度。3m。 在废液后再接阻尼管(废液管了)3m

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  • Easy-Boy

    第3楼2008/09/12

    从反应的完整度、流动相的ph着手看看。

    shmily1173 发表:我用高效液相仪荧光检测硫酸新霉素,由于硫酸新霉素没有紫外吸收基团,我用的是国外的氯甲酸芴甲酯的衍生化试剂,结果每次衍生化试剂出峰时间都是3分钟左右,很稳定,可硫酸新霉素衍生化产物出峰时间总是不一致,一般在8-11分钟之间,有哪位高手做过麻烦给知道下,仪器是waters 2695,荧光仪是2475,急!急!急!

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  • 有水有渝

    第4楼2008/09/12

    应助达人

    我觉得衍生化的程度跟保留时间应该没有太大的关系,还是先从流动相及其对色谱柱的影响,柱温,环境温度等因素上考虑。关于衍化程度,可以通过对比试验取得第一手资料,如不同的衍生时间,不同厂家或批号的衍生试剂,衍生化温度等。

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