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【求助】关于HPLC中流动相的问题.

pb123123

2008/11/19

液相色谱（LC）

大家好,刚刚接触HPLC,不过因为仪器过于太贵而又没有人指导的情况下,问题比较少而且比较简单,所以没有打800电话,而在此请教各位高手.
关于流动相的配制我想问下,标准上面经常说要把色谱级的试剂和别的试剂混合,比如说乙腈:水=5:95,是把试剂先混合好了在放到一个溶剂瓶中,还是分别把两种试剂放入两个溶剂瓶中,然后在工作站上面实现乙腈:水=5:95呢?还有做完之后,需不需要把冲洗阀打开,用水冲洗系统(即让柱子还是浸泡在乙腈:水=5:95的流动相中)?

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It is me!

第1楼2008/11/19

如果你仅仅是5:95的话可以配制好放在一个瓶子里.如果还有其他的比例或者梯度就放在两个瓶子里.

做完后要是有缓冲液就需要用水冲洗系统.

柱子是保存在乙腈里面的.
pb123123 发表:大家好,刚刚接触HPLC,不过因为仪器过于太贵而又没有人指导的情况下,问题比较少而且比较简单,所以没有打800电话,而在此请教各位高手.
关于流动相的配制我想问下,标准上面经常说要把色谱级的试剂和别的试剂混合,比如说乙腈:水=5:95,是把试剂先混合好了在放到一个溶剂瓶中,还是分别把两种试剂放入两个溶剂瓶中,然后在工作站上面实现乙腈:水=5:95呢?还有做完之后,需不需要把冲洗阀打开,用水冲洗系统(即让柱子还是浸泡在乙腈:水=5:95的流动相中)?

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dickwang2008

第2楼2008/11/19

如果你使用的是多元泵，那么你就将各个流动相分别装入瓶中即可，可以设置程序来混合；如果是单元泵，那就需要你事先在一个瓶中按比例混合好。对于你的第二个问题，分析完毕后只需要冲洗柱子即可，不需要冲洗阀的。
pb123123 发表:大家好,刚刚接触HPLC,不过因为仪器过于太贵而又没有人指导的情况下,问题比较少而且比较简单,所以没有打800电话,而在此请教各位高手.
关于流动相的配制我想问下,标准上面经常说要把色谱级的试剂和别的试剂混合,比如说乙腈:水=5:95,是把试剂先混合好了在放到一个溶剂瓶中,还是分别把两种试剂放入两个溶剂瓶中,然后在工作站上面实现乙腈:水=5:95呢?还有做完之后,需不需要把冲洗阀打开,用水冲洗系统(即让柱子还是浸泡在乙腈:水=5:95的流动相中)?

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雾非雾

第3楼2008/11/19

应助达人

我们是用二元泵,这样就分开装,还可以实现梯度洗脱,分离效果好.如果是单元泵就只能混合好再用,也只能恒比洗脱了.流动相没有用缓冲盐的话可以不用水冲洗柱子,就用流动相冲洗柱子防止样品残留就行.
dickwang2008 发表:如果你使用的是多元泵，那么你就将各个流动相分别装入瓶中即可，可以设置程序来混合；如果是单元泵，那就需要你事先在一个瓶中按比例混合好。对于你的第二个问题，分析完毕后只需要冲洗柱子即可，不需要冲洗阀的。

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pb123123

第4楼2008/11/19

谢谢各位,已经收到,明白.

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知足常乐！

第5楼2008/11/19

如果是单泵就装在一溶剂瓶中
做完之后用水相较多的溶剂冲洗，后用乙腈或者甲醇保存

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