【资料】欧盟兽药检测方法（之十四）

7. 仪器设备
7.1—7.14 参见Sg 1.4中设备
7.15 GC-MS，带ITS40离子阱的质谱（Finnigan Mat，San Jose，CA，USA）
7.15.1 气相色谱柱为30m*0.25mm，内涂0.25μm的DB-5（J&W）。不分流进样，柱温为100℃，保持2分钟后以5℃/min程序升温至150℃，再以20℃/min程序升温至250℃并保持3分钟。（总程序升温时间为20分钟）。
7.15.2 正化学离子源质谱（反应气：丁烷），每秒扫描一次，扫描时间20分钟，扫描范围m/z90-400（灯丝电压：倍增电压，延迟600秒）
7.15.3 扫描所得痕量甲状腺抑制物峰的保留时间和碎片离子见表1。
7.15.4 工作站
7.15.5 打印机
7.15.6 自动进样器（100μL）
上列公司及产品仅供参考，相当试剂，试验材料及设备同样可采用。
表1.
药品 RT（min） 离子1 离子2 离子3（MH+）
TAP 13.2 171 186 259
TU 13.4 257 273 345
MTU 14.3 271 287 359
DMTU 15.2 285 301 373
PTU 15.6 299 315 387

8. 样品及取样程序
8.1 样品属性：样品应符合64/433/EEC指令中的定义及要求，关于进行肉中兽药的残留对样品的要求。如果肉中未检测其残留，可用动物的体液或排泄物作为样品来进行检测。
8.2 样品量：其数量必须满足本实验要求，必要时须满足复验所需的量。
8.3 样品的传递与包装须满足实验室能正确识别的要求。
8.4 包装、保存、运输的方法必须保持样品的完整性并不致产生检验结果的偏差。分析甲状腺抑制物的样品的保存与运输须在-18℃以下。

9. 测定步骤
9.1—9.14 参见Sg 1.4的实验过程
9.15 小心刮下薄层板上含有药物的斑点并转移至自动进样器小瓶中（7.16），加入25μL MSTFA混匀，加热该进样器小瓶至100℃并保持15分钟。在硅胶沉淀后取1-2μL上清液进行GC-MS分析。
9.16 GC-MS分析1μL标准品混合溶液（6.14）。

10. 结果计算
10.1 定性鉴别
对未知化合物的定性鉴别须同时采用比较其标准品的GC保留时间及MS的图谱来进行鉴别。
10.2. 回收率
经汞化柱后甲状腺抑制物TU、MTU、PTU、DMTU的回收率>78%，而PhTU为17%，TAP 60%。
添加至肉、血浆、奶中的内标、DMTU的回收率见表2
表2. 100μg/kg DMTU的添加回收率
样品 检测的结果±SD（μg/kg）
PTU MTU TU
肉 106±5.5 102±13.7 97±21.8
血浆 84±6.2 98±5.0 76±5.7
奶 88±6.9 105±3.6 85±8.0
GC-MS法测定的回收率尚未确定。
10.2 精密度
10.2.1 重现性：按添加浓度100μg/kg加入至肉样品中，对方法每一测定步骤进行精密度试验，其重现性测定结果见Sg 1.4的表3。结果为De Brabander、Verbeke、GhenT所提供。

11．-15。
略

16. 检验流程图
动物组织 加入甲醇与内标物 匀质 汞化柱渗滤

衍生化 HPTLC 荧光检测（366nm）

刮下薄层板上的待测物斑点 TMS衍生化

GC-MS 结果计算