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【求助】肽图检查法

blacktea320

2008/12/11

液相色谱（LC）

中国药典2005版三部附录43页--肽图检查法中的第一法，我感觉样品前处理写的比较模糊，所以在此请教做过或知道如何做的老师：
1）、“按1：50（mg/mg）加入胰蛋白酶溶液（0.1mg/ml）”
这里1：50是指供试品：胰蛋白酶吗？是不是如果供试品是1mg的话，那要加入0.1mg/ml的胰蛋白酶500ml?还是反过来呢？（其他文献上似乎是后者）
2）、“在37C保温24小时后，按1：10加入50%醋酸溶液”
这里的1：10又是怎么比法呢，其他一些文献中大多没有这一步骤，不知道什么缘故？
希望老师能详细解释一下，最好能把全部的操作过程发给我，非常感谢！！！

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blacktea320

第2楼2008/12/12

没有做过的老师吗

0

tianru的爸爸

第3楼2008/12/12

是反过来的：50mg样品，1mg酶。——否则肽图就该是酶的色谱图了。
blacktea320 发表:中国药典2005版三部附录43页--肽图检查法中的第一法，我感觉样品前处理写的比较模糊，所以在此请教做过或知道如何做的老师：
1）、“按1：50（mg/mg）加入胰蛋白酶溶液（0.1mg/ml）”
这里1：50是指供试品：胰蛋白酶吗？是不是如果供试品是1mg的话，那要加入0.1mg/ml的胰蛋白酶500ml?还是反过来呢？（其他文献上似乎是后者）
希望老师能详细解释一下，最好能把全部的操作过程发给我，非常感谢！！！

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tianru的爸爸

第4楼2008/12/12

也是一样：10ml样品体系，加入1ml 50%醋酸溶液。
blacktea320 发表:中国药典2005版三部附录43页--肽图检查法中的第一法，我感觉样品前处理写的比较模糊，所以在此请教做过或知道如何做的老师：
2）、“在37C保温24小时后，按1：10加入50%醋酸溶液”
这里的1：10又是怎么比法呢，其他一些文献中大多没有这一步骤，不知道什么缘故？
希望老师能详细解释一下，最好能把全部的操作过程发给我，非常感谢！！！

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blacktea320

第5楼2008/12/13

谢谢老师的解答，另外还有个问题想请教一下：加50%醋酸的目的是什么？为什么好几个文献中都没有这一步呢？
谢谢！
lxdongzi2003 发表:也是一样：10ml样品体系，加入1ml 50%醋酸溶液。

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