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【讨论】标准曲线不能定量

液相色谱(LC)

  • 前天用几种物质做了个混标浓度梯度标准曲线,线性很好,有4个9,但是当用里面的一种物质配了个浓度来验证时发现,计算出来的浓度是已知浓度的3倍,这到底是怎么回事啊?我的浓度绝对没有配错,我那个单标又重新配了好几次来测,计算出来的就是不是我配的浓度,数据是waters自己处理的,没有人为误差。

    另外还有个问题:我的混标中,其他几种物质在同一浓度下峰都差不多高,而有一种却是峰很低,更奇怪的是它随着浓度的增加,反而峰越来越小,这是怎么回事?是不是还是说明我的混标配的有问题啊?

    最后我的混标峰中,有些物质分的不是很开,是不是对于计算峰面积也有影响啊?
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  • foxling2

    第1楼2009/03/14

    如果你用的是waters empower软件,可能的原因是你建立处理方法时,在选择线性的哪一步选择了默认的“线性”计算方式,如果选择默认的“线性”方式,可能会出现浓度高于正常、正常、低于正常三种情况。我也是最近才遇见的。要解决其实很简单,在选择线性哪一步,选择“线性过原点”方式,就不会出现浓度大3倍的情况。

    其次,你的第二个问题,有可能是对照品的稳定性、溶解性问题,应该考察以下,或者在流动相中溶解不好,都应该考虑一下

    最后,分离度不好当然影响计算。要不药典为什么规定分离度必须大于1.5才能进行含量计算呢

    yuq 发表:前天用几种物质做了个混标浓度梯度标准曲线,线性很好,有4个9,但是当用里面的一种物质配了个浓度来验证时发现,计算出来的浓度是已知浓度的3倍,这到底是怎么回事啊?我的浓度绝对没有配错,我那个单标又重新配了好几次来测,计算出来的就是不是我配的浓度,数据是waters自己处理的,没有人为误差。

    另外还有个问题:我的混标中,其他几种物质在同一浓度下峰都差不多高,而有一种却是峰很低,更奇怪的是它随着浓度的增加,反而峰越来越小,这是怎么回事?是不是还是说明我的混标配的有问题啊?

    最后我的混标峰中,有些物质分的不是很开,是不是对于计算峰面积也有影响啊?

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  • yuq

    第2楼2009/03/14

    如果你用的是waters empower软件,可能的原因是你建立处理方法时,在选择线性的哪一步选择了默认的“线性”计算方式,如果选择默认的“线性”方式,可能会出现浓度高于正常、正常、低于正常三种情况。我也是最近才遇见的。要解决其实很简单,在选择线性哪一步,选择“线性过原点”方式,就不会出现浓度大3倍的情况。

    [/quote]

    明天试一下,怎么“线性过原点”就会影响这么大啊?

    foxling2 发表:

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  • 雾非雾

    第3楼2009/03/14

    应助达人

    当然我们是岛津的,做的标准曲线经常不过原点的。实际还必须要过原点吗?

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  • 毛毛虫

    第4楼2009/03/14

    可能是你后配的那个标准物质和已知物质重复了

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  • 老多_小多

    第5楼2009/03/15

    数据是waters自己处理的,你在拿带线性回归的计算器验证下回归方程看会错吗?

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  • mrzhanglijun

    第6楼2009/03/27

    软件的问题吧,好好调调吧

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