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【哺育新手活动】色谱柱的使用和维护

活到九十学到一百

2009/03/19

液相色谱（LC）

一、色谱柱的使用
反相色谱柱一般是保存在甲醇或乙腈中。使用前一定注意所使用的流动相和甲醇或乙腈能够互溶。色谱柱在保存过程中有可能因为溶剂的挥发而干涸，所以在使用流动相分析之前应使用10—20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。如果所使用的流动相中含有缓冲盐，则应注意用水作为过渡，而不能直接将有机溶剂和缓冲盐直接混合。测试结束后冲洗柱子也要注意这一点。还有一点需要注意的是最好不要使用纯水冲洗色谱柱。对于非极性柱，比如C8和C18，由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链，造成柱效下降。另外，分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜，出现样品不保留而使分离度下降，重复性差，所以对于一般的C8和C18柱，有机溶剂的比例不应低于5%。
二、色谱柱的再生
再生过程中用来冲洗色谱柱的溶剂体积可以参照下表：

再生过程及溶剂冲洗顺序可参见下表：

三、色谱柱的维护
1.尽量能够使用预柱或保护柱保护色谱柱；
2.大多数色谱柱的PH范围是2—8，尽量不要超过范围使用；
3.避免流动相的组成或比例急剧变化；
4.流动相使用前必须进行过滤和脱气处理；
5.如果使用极性或粒子性的缓冲液作流动相，实验完毕后应将色谱柱冲洗干净。

精
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老多_小多

第1楼2009/03/19

图发错了还可以修改的，我给你改了

0

〓猪哥哥〓

第2楼2009/03/19

冲洗残留性强的物质用硫酸。
是硫酸水溶液和有机相一起冲洗？一般比例多大？

0

风行

第3楼2009/03/20

同问楼上的问题。
请楼主赐教。

0

wangyad168

第4楼2009/03/21

文章已看，写的很好．
caozk 发表:同问楼上的问题。
请楼主赐教。

0

IC_007

第5楼2009/03/21

文章不错，经验之谈，学习中

0

flytiger603

第6楼2009/03/21

我很少用硫酸冲的，我一般用0.01%的磷酸洗。硫酸一般用0.05mol的就可以了
主要根据你柱子的使用说明书来就不会错的

0

ppttmmyy

第7楼2009/03/22

总结的比较全面,而且也实用!

0

tony6774

第9楼2009/03/25

挺系统，不错！

0

fengxuemei

第10楼2009/03/25

请教一下：如果不小心用水冲洗了柱子，且让水在柱子里保留过夜，会不会对柱子造成不好的影响啊？

0

村长

第11楼2009/03/30

如果水相没有缓冲盐，第二天早上就用有机相冲问题不大

0

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