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【求助】回收率不好,怎么办?(续......)

  • suiyou2011
    2009/04/10
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我采用的是内标法,测空白回收率.
    这几天一直在侧(HPLC),发现,对照品A、B,B的回收率总是不合格,只有53%,A的则能达到98.5%,实在不知道是为什么,还望大家指点!

    另:A、B都不是很稳定,光热都对其有影响

    .............................................................

    我有改变了条件,可现在还是有问题,现在,A的回收率120%多,B的80%多,是在搞不明白,恳请大家指点!
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  • 知足常乐!

    第1楼2009/04/10

    对光和温度敏感的样品,回收率是不怎么好测定
    范围应该放宽点
    慢慢来吧

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  • suiyou2011

    第2楼2009/04/10

    可放宽的话,那是什么范围啊?

    wenshaowei-2008 发表:对光和温度敏感的样品,回收率是不怎么好测定
    范围应该放宽点
    慢慢来吧

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  • 老多_小多

    第3楼2009/04/10

    对光和温度敏感的样品,回收率一般会低
    跟你的样品处理也有很大关系,不烦写下来大家分析下,
    其实80%已经算可以了

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  • 老多_小多

    第4楼2009/04/10

    另外A、B两个物质会相互转化吗?

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  • suiyou2011

    第5楼2009/04/10

    处理方法:
    称取50mg的湿细胞,加入A、B各0.1 ml(母液浓度分别为124ug/ml和164ug/ml),再加入0.5ml 的内标物(浓度214 ug/ml),加提取溶剂超声15min,之后定容到10min,将提取液过滤后,用流动相稀释10倍,进液相检测。

    附:做标线时内标的加入量为1ml

    A、B之间是不会相互转化的。

    80%可以了,但120%不行吧?

    emoc98311 发表:另外A、B两个物质会相互转化吗?

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  • suiyou2011

    第7楼2009/04/11

    要换一种方法吗?
    这个直接加入的,测空白回收,也存在这个问题啊?

    另外,还想请教一个问题,就是关于一点校正,在测回收率的时候,校正之后再用标线做,对吗?

    zhuxinchun1979 发表:方法不可靠

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  • 没谱

    第8楼2009/04/13

    B的浓度是不是跟A相差得很大?A,B都是主要成分,还是B是有关物质?

    主要成份和有关物质的回收率要求是不一样的

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  • 没谱

    第9楼2009/04/13

    晕,没细看后面的跟帖

    是不是峰面积差得很大造成的回收率差异大?

    一点校正法好像是指你的方法已经建立起来,线形精确度精密度等都很理想,在测样的时候,不用每次再作标准曲线,而只作一点对照用于计算。这个应该是外表法吧。

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  • suiyou2011

    第10楼2009/04/13

    恩,是的,峰面积的差异很大。
    我用的是内标法,标线的R都为0.9977。
    色谱条件是确定的哦,标线也是合格的,所以测回收率检验

    lzgxgz 发表:晕,没细看后面的跟帖

    是不是峰面积差得很大造成的回收率差异大?

    一点校正法好像是指你的方法已经建立起来,线形精确度精密度等都很理想,在测样的时候,不用每次再作标准曲线,而只作一点对照用于计算。这个应该是外表法吧。

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  • 没谱

    第11楼2009/04/13

    色谱条件是确定,那就应该经过验证,你这个B成分是不是不是主要成份,或者是有关物质,那么这样的回收率有可能可用。

    如果是主要成分,回收率要求高,你就得建立自己的方法,对液相条件进行修改,分离度等条件没问题,可以不变,可以在增加B组分吸收面积上做文章,以减少误差,例如:改变检测波长,性质不稳定进行衍生化,增加柱温等。

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