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【求助】求教普通的液液分配色谱怎么操作???

液相色谱(LC)

  • 我想使用液液分配色谱分离两个极性相近但溶解度相差较大物质,但是不知道这种色谱法的具体操作方式,请哪位大侠指导指导,感激不尽!!!
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  • Easy-Boy

    第1楼2009/04/29

    是不是用不同溶剂萃取的方法啊,还没听说过有这种仪器,更象一个原理。
    液液分配色谱是根据样品各组分在不相溶的两相间分配系数的不同从而实现分离的。流动相为有机溶剂、水或有机溶剂—水等混合溶剂,固定相是由固定液(如十八烷、聚乙二醇)涂渍在惰性载体或通过化学反应键合到硅胶表面上而组成的,它与流动相互不相溶,且有一明显分界面。当样品溶于流动相后,经色谱柱在两相间进行分配,待分配达到平衡时,样品组分的分配服从于下式:

    k= Cs / Cm = k′Vm / Vs (1)

    式中k是分配系数,k′为分配比,Cs和Cm分别是组分在固定相和流动相中的浓度,Vs和 Vm分别表示色谱柱中固定相和流动相的体积。k值除与组分的性质、固定相及流动相的性质有关外,还与温度、压力有关。在一定条件下,k值的大小反映了组分分子与固定液分子间作用力的大小,k值大,说明组分与固定相的亲和力大,即组分在柱中滞留的时间长,移动速度慢。分离顺序决定于分配系数的大小,分配系数相差越大,愈容易实现分离。
    根据所选用的流动相与固定相相对极性不同,液液分配色谱又分为两类:固定相的极性
    大于流动相的极性,称为正相分配色谱;固定相的极性小于流动相的极性,称为反相分配色
    谱。化学键合固定相反相高效液相色谱中,流动相较简单,一般由甲醇—水、乙腈—水、乙
    腈—水—盐或甲醇—水—盐等体系构成,流动相的有机溶剂浓度、pH值和盐浓度的变化,可以改善洗脱强度,提高分离效果,所以,化学键合相反相HPLC色谱应用非常广泛,适于分离几乎所有类型的化合物。

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