【求助】调味料中的辣椒素的HPLC分析。

没做过，确定是用液相做吗，可以到维普或一些数据库中查查啊。

似乎原来见过，我找找看
找到了，如下：

火锅底料中辣椒素测定方法-高效液相色谱法
A.1　原理
样品中的辣椒素用甲醇＋四氢呋喃(50＋50)混合液提取，然后用高效液相色谱法C18反相柱经二极管阵列检测器检测，以保留时间和200nm～350nm扫描图谱定性，峰面积定量。最小检出量为1.0mg/kg•L，线性范围为0mg/L～100mg/L。
A.2　试剂
A.2.1　超纯水用符合GB/T 6682一级水。
A.2.2　甲醇 色谱纯。
A.2.3　四氢呋喃 分析纯重蒸后使用。
A.2.4　标准物质：辣椒素（纯度≥99%）、二氢辣椒素（纯度≥90%）
A.2.5　辣椒素标准溶液的配制
精确称取辣椒素和二氢辣椒素，用甲醇配成浓度为 1mg/mL辣椒素和1mg/mL 二氢辣椒素的标准贮备液，贮于冰箱中备用。使用时用甲醇稀释成0.1mg/mL 的辣椒素和二氢辣椒素标准使用液。还可根据需要可进一步用甲醇稀释至适当浓度。
A.3　主要仪器和设备
A.3.1　高压液相色谱仪（二极管阵列检测器）。
A.3.2　ODS C18 反相柱，4.6mm×250mm ，5µm。
A.3.3　分析天平：感量0.1mg。
A.3.4　组织捣碎机。
A.3.5　数控型 超声波清洗器（超声工作频率：40KHZ±10%，输入超声电功率：100W±30%；数显温度可调：20℃-80℃±10℃）。
A.3.6　离心机 3000r。
A.3.7　旋转蒸发器。
A.4　测定方法
A.4.1　试样提取
A.4.1.1　半固体底料
将样品均质后，准确称取10.00g样品于100mL烧杯中，加入甲醇+四氢呋喃(50+50)混合溶液50mL，用保鲜膜封口后放在 60℃ 水浴条件下，使用超声波清洗器提取30min，离心5min，取上清液。然后，将渣滓再用甲醇+四氢呋喃(50+50)混合溶液50mL，使用超声波清洗器提取10min，再重复提取残渣一次。合并三次上清液，70℃～75℃ 温度下浓缩至（40～50）mL后，置于分液漏斗中，弃去油相，再用甲醇+四氢呋喃(50+50) 混合溶液定容至50mL，经0.45µm滤膜过滤后进行色谱分析。根据样品中辣椒素总量和检测器的灵敏度，必要时可以改变稀释浓度。
A.4.1.2　固体底料
将样品融化后均质，凝固后称量。提取、浓缩步骤同B.4.1.1。浓缩后，置于-4℃冰箱中2h，离心，取上清液，甲醇+四氢呋喃(50+50)混合溶液定容至50mL，经0.45µm 滤膜过滤后进行色谱分析。
A.4.2　测定
A.4.2.1　液相色谱测定参考条件
洗脱液：A水，B乙睛。   
梯度洗脱：检测波长:280nm；流速:l.0mL•min-1；记录时间:45min；进样量:20μL（标样10μL）。梯度条件见下表。
表    梯度条件
时间（min）    流动相    曲线
    A%    B%   
0    55    45    线性
10    50    50    线性
25    35    65    线性
40    0    100    线性
45    0    100    线性
47    55    45    线性
A.4.2.2　测定
按4.2.1的条件进行HPLC分析，用标准物色谱峰的保留时间定性；用外标法单点或多点校准法，以峰面积定量。
A.4.2.3　辣椒素和二氢辣椒素标准品色谱图见下图。
图    辣椒素和二氢辣椒素混合对照品HPLC图谱（a为辣椒素；b为二氢辣椒素）
A.5　测定结果计算
A.5.1　辣椒素总量计算
辣椒素总量以辣椒素与二氢辣椒素之和除90%计。
A.5.1.1　辣椒素含量计算见（A.1）式。
…………………………………（A.1）
式中：
X1——试样中辣椒素的含量，单位为毫克/克（mg/g）；
C1——由标准曲线上查到辣椒素的含量，单位为微克/毫升（µg/mL）；
V——样品定容体积，单位为毫升（mL）；
m——样品质量，单位为克（g）。
99%——辣椒素标样纯度，单位百分数（%）；
2——进样量扩大倍数。
A.5.1.2　二氢辣椒素含量计算公式见（A.2）式。
…………………………………（A.2）
式中：
X2——试样中二氢辣椒素的含量，单位为毫克/克（mg/g）；
C2——由标准曲线上查到二氢辣椒素的含量，单位为微克/毫升（μg/mL）；
V——样品定容体积，单位为毫升（mL）；
M——样品质量，单位为克(g)。
90%——二氢辣椒素标样纯度，单位百分数（%）；
2——进样量扩大倍数。
A.5.1.3　辣椒素总量计算公式见（A.3）式。
…………………………………（A.3）
式中：
X——试样中辣椒素总量的含量，单位为毫克/克（mg/g）；
X1——见（A.1）式；
X2——见（A.2）式；
90%——规定的常数，单位为百分数（%）。
A.5.2　测定结果的允许偏差
同一实验室，同时测定或重复测定辣椒素和二氢辣椒素的计算结果偏差绝对值≤10%。

应助达人

据说有人用甲醇水做流动相，二极管阵列检测器，不知道用什么处理方法，如什么溶剂溶解等。等待做过的版友的回复。