【讨论】如何设置梯度起始点

我觉得这个应该和做样的方法是配套的，我平时做就是找出过度点，然后慢慢切换，一下由水或缓冲盐切换过来总觉得不妥。

感觉你提问的信息不足。流动相洗脱，即使是梯度洗脱，一般也不会用100%水相的，或多或少会用一点与水相相溶的有机相。要不然时间一长，次数一多，会导致色谱柱填料塌陷，损坏柱子。对于大多数反相柱（如C18）分析而言，摸索一个梯度洗脱条件，开始的梯度，可以用5%左右的有机相，剩余的用水相（纯水或缓冲液），在后续的梯度设置里，逐渐加大有机相比例，最后需要用高比例的有机相走一会以洗掉柱子上可能残留的脏东西，然后再走一会初始梯度以平衡柱子。