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【讨论】乙腈的紫外吸收

  • sdcuiyujie
    2009/06/28
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我做HPLC用的是水和乙腈,比例是95:5,设定波长是196nm。出现了好多问题,首先作了一下乙腈的吸收,发现吸收很大;另外一个是每次做的谱图都不一样,差别大;基线噪音大;有的峰特别宽。到底是怎么回事?
    用的是紫外检测器。
    请大家帮帮我啊。



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  • 辣椒王

    第1楼2009/06/29

    请教一下你测试乙腈紫外吸收的目的是什么?
    紫外波长范围一般是说在190-400或者200-400,196nm本来就是属于高能紫外区了,在这个范围紫外吸收强干扰大是不可避免的。你想用这个波长来定量5%乙腈基本上是不可能的事情。

    sdcuiyujie 发表:我做HPLC用的是水和乙腈,比例是95:5,设定波长是196nm。出现了好多问题,首先作了一下乙腈的吸收,发现吸收很大;另外一个是每次做的谱图都不一样,差别大;基线噪音大;有的峰特别宽。到底是怎么回事?
    用的是紫外检测器。
    请大家帮帮我啊。



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  • 小余儿

    第2楼2009/06/29

    在这个波长下乙腈肯定是有吸收峰的,如果水不好也会产生吸收峰,流动相的质量很关键的,还有混合时的脱气也很关键,如果达不到要求建议改用其他检测器,如蒸发光,可能流动相的影响会小些。

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  • sdcuiyujie

    第3楼2009/06/29

    因为我做高效液相色谱用的流动相是水和乙腈,如果乙腈有紫外吸收,是不是就干扰了样品的测定啊

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  • sdcuiyujie

    第4楼2009/06/29

    我们学校的液相只有紫外检测器
    比较郁闷

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  • xysu

    第5楼2009/06/30

    乙腈在这个波长下会有一点吸收的,乙腈还有水里面的微量杂质在这么低的波长下也会出峰,总之,这么低的波长,基线要走平是很难很难的。
    我倒试过一次在200nm下检测,在乙腈水条件下基线根本没法看,后把水改成磷酸盐buffer,搞定。不过我那个化合物在200下吸收很强,浓度也配得高,这样基线噪音大一点也无所谓啦。我们也不定量。

    sdcuiyujie 发表:我们学校的液相只有紫外检测器
    比较郁闷

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  • sdcuiyujie

    第6楼2009/06/30

    谢谢,我想试试您的建议。
    谢谢大家

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  • kanjianwei

    第7楼2009/07/02

    检测波长太低了。溶剂干扰太大。建议更换波长或者流动相。。。
    另外不知道你用什么溶剂溶解样品,,最好选流动相。。

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  • sdcuiyujie

    第8楼2009/07/03

    流动相是水和乙腈
    我用的溶剂是水

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  • sdcuiyujie

    第9楼2009/07/03

    谢谢大家了
    我决定不用紫外检测器了
    想试试蒸发光散射检测器
    有成果了,告诉大家

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  • 永恒的心

    第10楼2010/03/01

    是不是你用的乙腈不好,建议更换试一下

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