【讨论】奇怪的事情

你要泼墨如水，不能惜墨如金。把问题说详细点，比如做的是什么组分？这个很关键，你不说详细了，估计没几个人能解答你的疑问啊。

目标物的热稳定性以及是否属于蛋白类物质，是否与蛋白结合紧密的离子型化合物，是否考虑和验证过？

考虑是否不稳定？是否高蛋白结合？是否可能被血浆中某些酶水解？

可以查阅相关文献看看。

可能不只是热不稳定的因素，热不稳定应该不会什么都没有的，你可以考察一下酶的稳定性，不过你最好把问题说的具体一点，你的标准曲线出峰了吗？

不好意思，呵呵，好像真的说得不清不楚的。
我是同时做几种生物碱来着。流动相用的是10mmpl/L的乙酸铵和甲醇，梯度洗脱，工作溶液混标的出峰情况还好，现在是在血液中加入一定量的混标，再用乙腈沉淀蛋白，然后做SPE，上液质后发现先出峰的两个生物碱（茶碱和氧化苦参碱）没有出峰，起初是怀疑做SPE的时候淋洗溶剂和洗脱溶剂不合适，但尝试了很多种还是没有改善，后来就不做SPE，看是否是在SPE这步出的问题，但是依然没发现目标物。这两种组分应该是挺稳定的，应该不会和蛋白作用才对啊，找了很多原因，还是没解决，实在是想不到还有什么了。
不知道表达得是否清楚，谢谢大家了

楼主请把你的色谱条件发上来，然后附带一张混标的色谱图和混标加血浆处理后的色谱图，这样可以针对问题提问。

你拿三氯醋酸沉淀看看，回收率应该不会差的
氧化苦参碱和茶碱我们以前都做过，具体记得不太清楚了，只记得不需要接SPE，直接做就挺好的
要不试一试碱化提取，回收率也不会差，又干净

需要提醒你的是，可能你的药物出来了，可是与你标样在走样的时候出峰时间不一样，酸碱性的变化很容易导致碱性药物发生漂移的，所以你还是考虑一下，在你的流动相中加入一定比例挥发性酸。

我做的是血样，如果不用SPE净化处理的话好像不太好吧