第1楼2005/08/08
透射电镜样品制备步骤
一. 取材: 组织块小于1立方毫米
二. 固定: 2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次
1%锇酸固定液固定 2-3小时
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次
三. 脱水: 50%乙醇 15-20分
70%乙醇 15-20分
90%乙醇 15-20分
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20分
90%丙酮 15-20分
以上在4度冰箱内进行
100%丙酮 室温 15-20分三次
四. 包埋: 纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4小时
纯丙酮+包埋液(1:2)室温 过夜
纯包埋液 37度 2-3小时
五. 固化: 37度烘箱内 过夜
45度烘箱内 12小时
60度烘箱内 24小时
六. LKB-1型超薄切片机切片 50-60 nm
七. 3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
八. 日本电子JEM-1200EX透射电镜观察。拍片
这个是上海医科大学电镜室老师那里的简单步骤,或许能用上吧。我对此不懂的。