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【专题讨论第二期】手动进样的姿势

  • 〓猪哥哥〓
    2009/09/24
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 【专题讨论第二期】手动进样的姿势



    =====================================================================
    液相色谱【专题讨论】系列对液相色谱中的诸多专题进行讨论,希望能够从
    中建议起一种标准操作模式,尽量减少实验操作或数据处理带来的误差,提升
    重复性和重现性。同时诚邀液相色谱版主和专家对该活动进行话题引到或推
    荐,同时期待版友的积极讨论和经验分享。
    =====================================================================
    这一期讨论有:

    1、手动进样的姿势是怎么样的,怎么排出气泡,是进完样之后马上抽针,还是停留几分钟后拔出还是一直等到这一针走完?
    2、实验中会不会经常因为进样导致实验重复性不好?
    3、最后排除到手动进样,最后怎样加以改善?
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  • 柏坡

    第1楼2009/09/24

    手动进样

    以7725i手动进样阀为例,用液相专用进样针从样品瓶中吸取适量样品,如进样量小于定量环体积 用进样针按进样体积量取,如使用定量环定量注入量应为定量环体积的3倍以上,多出的样品从废液管排出。确认进样针内无气泡,用滤纸将进样针外壁擦拭干净,在进样阀的inject的位置插入进样针,将进样阀快速搬至load位置,注入样品,将进样阀快速搬至inject位置,启动采样,然后将进样针从进样口取出。







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  • 土老冒豆豆

    第2楼2009/09/24

    应助达人

    1、手动进样的姿势是怎么样的,怎么排出气泡,是进完样之后马上抽针,还是停留几分钟后拔出还是一直等到这一针走完?
    先取样,然后针头朝上排出气泡。进完样后马上抽针,关键是你每一针的动作都尽可能一致,这样重复性会好。虽然有的工程师和书上说进完样后要停留几分钟或者一直挂在那,但发现微量注射器的针头因为负重过多而变弯后基本就没这样做了。
    2、实验中会不会经常因为进样导致实验重复性不好?
    如果用微量注射器,排气泡不掉或者看刻度不准,会导致实验重复性不好。但现在基本都是利用定量环的体积(如20ul)来进样,用1ml注射器取样0.1ml这样,排气泡,进样,多余的样品留出,进样准确。
    3、最后排除到手动进样,最后怎样加以改善?
    如果一定要微量注射器手动进样。第一注射器质量要好,最好是进口的。第二室内光线充足,方便看到气泡。第三是抽取样品溶液时慢抽。第四是赶气泡时宁可攒够一个大大的气泡再排——好排空,也不要小小的气泡——难排空。

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  • rainbowchem

    第3楼2009/09/24

    既然是用定量环,为什么非得用微量注射器呢!随便找一个注射器(如5mL)进样就可以了,只要进样量大于定量体积的3倍即可,重复性也不会受影响的。

    土老冒豆豆 发表:1、手动进样的姿势是怎么样的,怎么排出气泡,是进完样之后马上抽针,还是停留几分钟后拔出还是一直等到这一针走完?
    先取样,然后针头朝上排出气泡。进完样后马上抽针,关键是你每一针的动作都尽可能一致,这样重复性会好。虽然有的工程师和书上说进完样后要停留几分钟或者一直挂在那,但发现微量注射器的针头因为负重过多而变弯后基本就没这样做了。
    2、实验中会不会经常因为进样导致实验重复性不好?
    如果用微量注射器,排气泡不掉或者看刻度不准,会导致实验重复性不好。但现在基本都是利用定量环的体积(如20ul)来进样,用1ml注射器取样0.1ml这样,排气泡,进样,多余的样品留出,进样准确。
    3、最后排除到手动进样,最后怎样加以改善?
    如果一定要微量注射器手动进样。第一注射器质量要好,最好是进口的。第二室内光线充足,方便看到气泡。第三是抽取样品溶液时慢抽。第四是赶气泡时宁可攒够一个大大的气泡再排——好排空,也不要小小的气泡——难排空。

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  • 〓猪哥哥〓

    第4楼2009/09/24

    进样口大小以及长度等限制了注射器的使用。

    rainbowchem 发表:既然是用定量环,为什么非得用微量注射器呢!随便找一个注射器(如5mL)进样就可以了,只要进样量大于定量体积的3倍即可,重复性也不会受影响的。

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  • elfstar

    第5楼2009/09/24

    说的很详细了

    再补充点
    (1)取样时,样品进入针里,如果在中间形成的气泡一般是敢不掉的,需要重新取样;针两端的气泡可以赶走,向上45度排除气泡
    (2)为了保证重现性,每次进样量一定要保证精确
    (3)建议进样完毕立即拔针,避免不必要的损坏

    土老冒豆豆 发表:1、手动进样的姿势是怎么样的,怎么排出气泡,是进完样之后马上抽针,还是停留几分钟后拔出还是一直等到这一针走完?
    先取样,然后针头朝上排出气泡。进完样后马上抽针,关键是你每一针的动作都尽可能一致,这样重复性会好。虽然有的工程师和书上说进完样后要停留几分钟或者一直挂在那,但发现微量注射器的针头因为负重过多而变弯后基本就没这样做了。
    2、实验中会不会经常因为进样导致实验重复性不好?
    如果用微量注射器,排气泡不掉或者看刻度不准,会导致实验重复性不好。但现在基本都是利用定量环的体积(如20ul)来进样,用1ml注射器取样0.1ml这样,排气泡,进样,多余的样品留出,进样准确。
    3、最后排除到手动进样,最后怎样加以改善?
    如果一定要微量注射器手动进样。第一注射器质量要好,最好是进口的。第二室内光线充足,方便看到气泡。第三是抽取样品溶液时慢抽。第四是赶气泡时宁可攒够一个大大的气泡再排——好排空,也不要小小的气泡——难排空。

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  • 小卢

    第6楼2009/09/24

    说的十分详细了

    依然可以补充点,不过是个人看法:
    a.土豆分析的进样后把进样针取出以免损坏进样针很有道理,并且还有个问题就是针头长时间在里面放着还容易把其垫片损坏
    b.保证重现性的做法只能靠熟练,因为定量环因为你进样的力度和快慢会有适当的变化
    c.排空注射针内的气泡最好的办法是用样品快速吸入、打出样品多次,仍然不行就用手弹几下针身即可。

    elfstar 发表:说的很详细了

    再补充点
    (1)取样时,样品进入针里,如果在中间形成的气泡一般是敢不掉的,需要重新取样;针两端的气泡可以赶走,向上45度排除气泡
    (2)为了保证重现性,每次进样量一定要保证精确
    (3)建议进样完毕立即拔针,避免不必要的损坏

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  • 柏坡

    第7楼2009/09/24

    再补充点

    手动进样器实际流路图:




    手动进样器使用注意事项
    1.如下图所示,排泄毛细管出口和针口必需在同一水平面,以防止倒流泄露或产生虹吸。





    2.在inject位置的时候,才可以取出手动进样器的进样针,以防止倒吸或产生气泡。这时候也可以清洗一下进样口。

    3.手动进样器在推针时尽量做到平稳均匀,保证进样的一致性。搬动进样阀时要果断,不要用力过猛。

    4.应选用液相专用的平头针

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  • 楚无伤

    第8楼2009/09/25

    呵呵
    最好用自动进样器


    开个玩笑
    缓吸快推、快插快拔

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  • englishchenqy

    第9楼2009/09/26

    我使用自动进样器,我个人认为:
    1、手动进样的姿势是怎么样的,怎么排出气泡,是进完样之后马上抽针,还是停留几分钟后拔出还是一直等到这一针走完?
    先取样,然后针头朝上排出气泡。外壁用滤纸搽干净。进到阀里面,等样品走过之后再拔出来。关键是要保证每一针都是同样的进样量和姿势,这样可以排除偶然误差
    2、实验中会不会经常因为进样导致实验重复性不好?
    只要自始自终都是一样的,重复性就会好

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  • polarij

    第10楼2009/09/26

    1、手动进样的姿势是怎么样的,怎么排出气泡,是进完样之后马上抽针,还是
    停留几分钟后拔出还是一直等到这一针走完?
    手动进样时进样针要顺着定量环的方向进入,这样可以保护进样针和定量环;如果进样针前段有气泡要多吸几次并多次排液,针不要离开液面,这样才能把气泡赶走,如果气泡在进样针的中部,就用手轻轻弹针体,把气泡赶到针体前端,再用前面的方法把气泡排走;
    进完样后一定要等这针走完或接近走完时再拔针。
    2、实验中会不会经常因为进样导致实验重复性不好?
    如果进样者手法不是很熟练,可能会导致重复性不好;另外停止时间太短也会导致样品重复性很差,一定要让样品走的时间长一些,一般要达到保留时间的二倍再停止。
    3、最后排除到手动进样,最后怎样加以改善?
    对进样针和定量环要每次用完进行清洗,首先用样品的溶剂进行清洗进样针河定量环,最后根据溶剂性质选择甲醇或水进行清洗进样针定量环。
    定量环有时也不是很准确的,我们以前用定量环控制进样量,但是产品平行性不是很好,后来与有关专家沟通,他们建议用进样针定量,因为针的误差是眼见为实,能控制的。

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