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【求助】色谱条件不同如何确定色谱峰与混标中各物质的对应关系

气相色谱(GC)

  • 我这几天正在测定蛋黄中FAME,买了sigma的Supelco37FAME混合标准品,
    标品图谱的色谱条件为
    色谱柱:SP-2560,100m*0.25mmID,0.20um
    柱箱温度:140摄氏度(5min)以4摄氏度/min升至240摄氏度
    载气:氦气,20cm/sec
    检测器:FID260
    进样口:1ul,260摄氏度,100:1
    我的实验的色谱条件:
    色谱柱:安捷伦DB-23,30m*0.25*0.25um
    柱箱温度:80度3min,以10度/min的速度升至170度,维持10min,再以5度/min的速度升至220度,维持3min
    载气:氮气0.5ml/min
    检测器:FID250
    进样口:1ul,240,20:1
    由于条件不同,出峰时间与标准品不同,但峰数量远大于37种,近五十种。不知道如何确定各峰与混标中各物质的对应关系,C4-C16确定还相对比较容易,后面就很难了,无论是峰高还是面积与标准品图谱相差很大,是不是我的色谱条件不合适,需要改进?还是有其他的方法?再有标品中浓度是不是和色谱峰面积对应,浓度大峰面积就大?请各位帮忙!
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  • zj2635

    第1楼2009/10/17

    看来楼主对气相色谱方法学验证的内容不熟,即使是条件完全相同,在不同的检测仪器上或者不同的人操作都会有差异,更何况你连条件都不一致,而且是混合物标准样,要想一一对应难度相当大,基本上属于重新建立方法。
    建议你将仪器条件先与标样统一,首先将标准在你的仪器系统条件下重现,再考虑混样试验;或者将混合标准样品中的每一种标准物质的样品找到,采用阳性对照或阴性对照的方式确定。

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  • yuyuheweixijie

    第3楼2010/04/05

    你好,想咨询您一个问题:我也想用37种脂肪酸混标测定,用混标是不是没有单纯标准品好测定?需要注意些什么?看您是达人,麻烦给点意见!

    zj2635(zj2635) 发表:看来楼主对气相色谱方法学验证的内容不熟,即使是条件完全相同,在不同的检测仪器上或者不同的人操作都会有差异,更何况你连条件都不一致,而且是混合物标准样,要想一一对应难度相当大,基本上属于重新建立方法。
    建议你将仪器条件先与标样统一,首先将标准在你的仪器系统条件下重现,再考虑混样试验;或者将混合标准样品中的每一种标准物质的样品找到,采用阳性对照或阴性对照的方式确定。

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  • 皮皮鱼

    第4楼2010/04/05

    都是FID,峰面积是具有可参比性的。利用确定组分,比较其他组分峰面积与标准组分峰面积之比,可以用来参考定性。
    但关键问题是你怎么有50种色谱峰?原方法中不能分开的异构体被你分开了?还是低含量杂质影响?如果低含量杂质,倒是可以用最小峰面积去掉,如果你色谱柱不同造成分离度过大,把不能分开的分开了,那就很难办了。
    按说这2种色谱柱固定相基本是一样的,怎么分离度变化这么大?古怪。用它的升温程序做一下看看。

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  • symmacros

    第5楼2010/04/05

    应助达人

    进样量相同。您的分流比1:20比标品1:100小,峰的数目要多。两根柱子相近,您在相同分流比下试试。

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