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【转帖】HPLC流动相溶剂的选择和缓冲液的配制-之选择

液相色谱（LC）

  • HPLC流动相溶剂选择的一般原则：
    1. 溶剂要与使用的检测器匹配对UV－Vis，主要考虑本底吸收，下面是常用溶剂在不同波长下的吸收值：

    研究表明，当流动相的A>0.7的时候，基线噪声会显著增加，一般选择的吸收值<0.5。当A>1.0时，基本就不能用使了。对于示差折光检测器，主要考虑样品和流动相的折光率，这里不再赘述。
    2. 选用的溶剂粘度要低、沸点适中使用低粘度溶剂，可减小容质的传质阻力，降低柱压，利于提高柱效。从分离制备和色质联用考虑，沸点要适中，低沸点的溶剂有它的优点；但仅仅用于分析，沸点太低，反而由于溶剂的挥发，造成保留时间的变化。
    3. 尽量不用高毒性的溶剂不只是环境，单从我们自身的安全考虑，当然用低毒溶剂最好。
    4. 溶剂对样品有足够的溶解力，样品如果不能溶解在选用的溶剂里，还怎么分析？但如果样品在流动相里溶剂仍然不大，可以用样品的最佳溶剂先溶解，再用流动相稀释，就可以了。
    知道了上面选择溶剂的一般原则，就不难理解为什么不用乙醇、丙醇做流动相的原因了，因为它们的粘度大。
    还有丙酮，虽然粘度和毒性较低、溶解度大、极性适中，但用于它的截至吸收波长为330nm，所以不常用，如果样品的吸收大于330nm，其实用丙酮是一个不错的选择。
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  • 该帖子已被版主-有水有渝加2积分，加2经验;加分理由:鼓励分享
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    +关注 私聊

  • phoebexjj

    第1楼2010/01/20

    对我来说很有用，谢谢啦！

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    +关注 私聊

  • wengjx1980

    第2楼2010/02/11

    丙酮的吸收太高，不好用

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  • mrhemin

    第3楼2010/02/23

    用丙酮当心管路中的某些部件被溶解

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  • 永恒的心

    第4楼2010/02/27

    很受用，谢谢楼主

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  • dgj05114050

    第5楼2010/06/07

    thank you for sharing

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  • piaopiaohu003

    第9楼2012/01/12

    谢谢楼主分享，真是太有用了！！！

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