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【讨论】氨基葡萄糖的衍生问题

  • wayz193476
    2010/03/23
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 请问一下,谁有做过用OPA(邻苯二甲醛)作为衍生剂来衍生氨基葡萄糖,如果做过的话,还请高人指点一下反应的条件,譬如温度,溶剂等等;在我所查的一篇文献中方法如下,将OPA和硼酸盐缓冲液和3-巯基丙酸按一定比例混合,先制成衍生剂,然后再和氨基葡萄糖溶液混合反应。我的问题是: 3-巯基丙酸的作用是什么;2 衍生剂和氨基葡萄糖溶液混合反应,具体条件是什么,
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  • 有水有渝

    第1楼2010/03/23

    应助达人

    这里有一个类似的参考文献可以看一下:
    http://www.doc88.com/p-4510210929.html

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  • 柏坡

    第2楼2010/03/23

    一般关于OPA衍生化测定氨基酸的实验,很少涉及衍生试剂的反应变化,这方面您可以咨询提供方法和试剂的供应商,他们会给出准确的答案。

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  • wayz193476

    第3楼2010/03/23

    谢谢关心,今天按照外国文献的方法做了,不理想,很郁闷,,,,

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  • 有水有渝

    第4楼2010/03/24

    应助达人

    找一找就按氨基酸的衍生条件试一下,好像是加温60度反应(太久没有做忘了),反应时间忘了.

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  • 柏坡

    第5楼2010/03/24

    是衍生不彻底还是分离度不好?多种氨基酸的分离效果并不那么理想。

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  • tiantan456

    第6楼2010/03/25

    这个试剂衍生反应速度很快的,比丹酰氯快多了,可搞成inline的。

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  • wayz193476

    第7楼2010/03/25

    我现在测是的标准品,经过衍生后,出峰了;但为了确定衍生的成功,又同时测了未衍生的氨基葡萄糖和衍生剂OPA(邻苯二甲醛),氨基葡萄糖没有峰,但OPA(邻苯二甲醛)却在同样的位置出峰了,但峰高稍微低一些;之后我又进了一针衍生物峰高也更低了。我知道OPA很容易氧化,所以现在就不能说明我的衍生到底成不成功,但网上曾有人说OPA不能发射荧光,这就怪了,那我做的OPA怎么就出峰了呢,很纠结,,,,,

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  • 老多_小多

    第8楼2010/03/25

    邻苯二甲醛,带苯环,应该是有荧光
    没有又怎么来衍生呢?

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  • wayz193476

    第9楼2010/03/26

    道理是这样的,问题是很多文献都用OPA,水杨醛等作为荧光衍生剂,那么如果有的话,那是不是OPA的荧光弱,而衍生后荧光强呢,或者说荧光的发射波长不一样呢,超纠结,盼复..........

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  • 老多_小多

    第10楼2010/03/26

    看你这个问题都不知道你是问OPA还是什么?
    衍生是因为被测物没吸收,衍生后就有吸收了

    wayz193476(wayz193476) 发表:道理是这样的,问题是很多文献都用OPA,水杨醛等作为荧光衍生剂,那么如果有的话,那是不是OPA的荧光弱,而衍生后荧光强呢,或者说荧光的发射波长不一样呢,超纠结,盼复..........

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