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【求助】求6-甲基尿嘧啶的LC方法

液相色谱(LC)

  • 有朋友做过6-甲基尿嘧啶的LC分析吗?请问流动相和波长分别是什么?C18可以分开吗?
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  • 有水有渝

    第1楼2010/04/06

    应助达人

    可以参考药典中的氟尿嘧啶。
    参考附子中尿嘧啶含量:
    附子—尿嘧啶的含量测定方法
    色谱条件 色谱柱:Hypersil C18 (4.60mm×25 mm,5μm)分析柱;流动相:0.05mol/ L磷酸氢二铵溶液;流速:0.8mL/ min;检测波长:254nm;柱温:20℃。
    对照品溶液的制备 精密称取尿嘧啶对照品,加蒸馏水制成0.012mg/mL的溶液。

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  • yszhou

    第2楼2010/04/06

    100%水?不需要甲醇或者乙腈吗?

    欧冠+世界杯(xky0230699) 发表:可以参考药典中的氟尿嘧啶。
    参考附子中尿嘧啶含量:
    附子—尿嘧啶的含量测定方法
    色谱条件 色谱柱:Hypersil C18 (4.60mm×25 mm,5μm)分析柱;流动相:0.05mol/ L磷酸氢二铵溶液;流速:0.8mL/ min;检测波长:254nm;柱温:20℃。
    对照品溶液的制备 精密称取尿嘧啶对照品,加蒸馏水制成0.012mg/mL的溶液。

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  • yszhou

    第3楼2010/04/06

    可能的杂质是4-甲基尿嘧啶,所以比较难分开,用什么样的梯度?谢谢指点!

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  • 有水有渝

    第4楼2010/04/06

    应助达人

    尿嘧啶实就是用于检测反相柱的死体积的,因为它的保留值很小,你加了一个甲基,建议可以从50甲醇试起。

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  • kylabs

    第5楼2012/01/31

    尿嘧啶的LC分析方法,不是普通的C18柱

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  • kylabs

    第6楼2012/01/31

    Method Conditions



    --------------------------------------------------------------------------------

    Column Cogent Diamond Hydride™, 4µm, 100A
    Catalog No. 70000-75P
    Dimensions 4.6 x 75 mm
    Mobile Phase DI Water + 0.1% Acetic Acid
    Flow rate 1.0 mL/min.
    Sample 1. Uracil
    2. Guanine
    3. Thymine
    4. Adenine
    Injection Volume 2.5 µL
    Detection UV 254 nm
    Temp 25° C


    Discussion

    --------------------------------------------------------------------------------

    This method is easy to prepare, use and reproduce. Note Excellent separation under 100% aqueous conditions with alternate selectivity. These bases are difficult to retain on columns with ordinary silica that contain significant amounts of silanols.

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