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【转帖】PCR仪使用说明

gotobio111

2010/04/15

PCR仪使用说明：
1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”，显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单：“-RUN ENTER PROGRAM PROGRAM ”准备执行程序。

2、放入样本管，关紧盖子。

3、如果要运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示：“-ENABLE DISABLE HEATED LID” 按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。

4、如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM，按《Proceed》，屏幕显示 “ -NEW LIST EDIT DELET”，按《Proceed》，1）选择NEW，命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认。

2）输入程序步骤：名字输入后，显示“ STEP1 _TEMP GOTO OPITON END”，按《Proceed》则可以输入温度（0～100℃），按《Proceed》确认后，则可以输入孵育时间，用《Select》键移动光标，输入数字，完成后按《Proceed》确认，跳到下一步，输入方式同上。

3）选择GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达9999次）（为实际循环数-1)。

4) 选择option，显示“STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE ”再选择increment，按《Proceed》确认，输入初始的温度，确认后输入时间，按《Proceed》确认，然后输入每个循环增加或减少的温度，增加用正值，减少用负值（-0.1℃～6℃），按《Proceed》确认。选择extend，按《Proceed》确认，输入每个循环增加或减少的时间（-60～60秒），按《Proceed》确认。

选择slop（指温度上升或下降的速率），输入温度的改变值（-0.1～1.5℃）按《Proceed》确认，然后输入加热或致冷的速度，按《Proceed》确认。

4）选择End，输入结束步骤。

5、输入完成的程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。

6、其它：用《pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。

编辑程序：

1、可以用《Cancel》键删除输错的值，输入新的值后按《Proceed》确认。

2、对于未输完的程序，要先输入END，按《Proceed》将程序储存后才能删除。

3、删除已经储存的程序：从RUN-ENTER菜单中选择RUN－PROGRAM，按《Proceed》，显示主菜单，选择DELET，用《Select》选择删除。

4、查看程序的步骤：在主菜单上选择LIST，按《Proceed》，用《Select》将选择名称，再按《Proceed》，显示程序的第一步，用《Select》键向前、向后翻页查看，此时不能改变程序的值。

编辑已有的程序：

1、从RUN-ENTER菜单中选择RUN－PROGRAM，按《Proceed》，显示主菜单，选择EDIT，按《Proceed》确认，用《Select》键选择要编辑的程序，按《Proceed》显示程序的第一步。

2、用《Select》键将光标移到要改变的温度或循环的值上，键入新值，按《Proceed》确认，按《Cancel》删除键入的值，出现空格，键入新值后确认。

注：一旦值被改变或删除，原来的值不能恢复，必须重新键入。

3、编辑时间值：必须重新键入小时、分钟、秒，按《Proceed》。

如何设置一个PCR体系：

一般分为8步：

1、预变性：可用94～95℃，2～10min，一般用5min。

2、变性：一般用94℃，30s～2min，一般45s～1min。

3、退火：温度自定，30s～2min。

4、延伸：70～75℃，一般72℃，对于＜2kb，＜1min；＞2kb，每增加1kb加1min。

5、循环数：一般25～35个循环。

6、最终延伸：72℃，5～15min。

7、保存：10℃，时间设为0。

8、END。

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