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【原创】lcms拖尾怎么办?

  • davidchen820927
    2010/05/16
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • LCMS遇到拖尾严重,我用的是waters仪器,做完了interllistar,按照优化条件进样分析,内标和药物峰都严重拖尾;在

    不接色谱柱直接通过双通进样后拖尾仍然严重,我的条件是:药物(皂苷类)分子量622,负离子模式,离子源 毛

    细管电压2.5,cone电压40,温度500,去溶剂气流600,cone气流10,分析器collision=35,子离子161,cone=28v,

    collision=12v,lc为75%乙腈-25%10mM醋酸铵,C18柱,请指教!谢谢!
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  • davidchen820927

    第1楼2010/05/16

    这是色谱图,请大家指教!
    左图是药物和内标混合物进样后的图谱,药物和内标的浓度都是250ng/ml,峰面积只有3000,5000,响应值太低了,拖尾严重;
    右图为不接色谱柱,连双通,进样后的图谱,药物浓度为250ng/ml,不含内标,药物峰面积没有变化,5000多,拖尾严重。

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  • hujiangtao

    第2楼2010/05/16

    应助达人

    柱子没有问题?

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  • davidchen820927

    第3楼2010/05/16

    柱子是新的,而且没接柱子就拖尾

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:柱子没有问题?

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  • 论坛版主招募|新窦

    第4楼2010/05/17

    没接柱子峰形本身就是很容易拖尾的,如果柱子是新的那柱效应该没问题吧,有用该柱子分析过其他物质吗?情况怎么样的?

    还有出峰时间过早了点也容易引起拖尾峰的,调节一下流动相试试。

    davidchen820927(davidchen820927) 发表:柱子是新的,而且没接柱子就拖尾

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  • davidchen820927

    第5楼2010/05/17

    按常理没接柱子峰形应该是对称的才对啊?怎么容易拖尾呢?

    新窦(capinter) 发表:没接柱子峰形本身就是很容易拖尾的,如果柱子是新的那柱效应该没问题吧,有用该柱子分析过其他物质吗?情况怎么样的?

    还有出峰时间过早了点也容易引起拖尾峰的,调节一下流动相试试。

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  • bigpalewolf

    第6楼2010/05/18

    双通的死体积应该比柱子大吧?而且没有富集作用。

    拖尾应该是LC的问题,如果是人参皂苷的话可以试试改变一下流动相。

    另外你的柱温多大!?增加一下热交换会不会好点!?

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  • 论坛版主招募|新窦

    第7楼2010/05/18

    没有柱子色谱峰就不会有分离,峰形不可能对称的。

    你的C18柱规格是多少?还有流速、柱温等。峰拖尾跟液相部分关系比较大,与质谱基本无关系。当然死体积也是会造成峰形拖尾的,所以连接各模式块的管路要尽可能短。

    davidchen820927(davidchen820927) 发表:按常理没接柱子峰形应该是对称的才对啊?怎么容易拖尾呢?

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  • davidchen820927

    第8楼2010/05/18

    二通的死体积不会比柱体积大,柱体积为0.4ml,药物在二通内的扩散应该不会比柱内大,我进的样品是纯药物标准品,不分离也应该是单对称峰吧。你说对吗?
    我的色谱柱ACQUITY UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*100mm,流速0.3ml/min,柱温45度。质谱条件如离子源温度,电压不会影响药物分子的电离程度吗?

    新窦(capinter) 发表:没有柱子色谱峰就不会有分离,峰形不可能对称的。

    你的C18柱规格是多少?还有流速、柱温等。峰拖尾跟液相部分关系比较大,与质谱基本无关系。当然死体积也是会造成峰形拖尾的,所以连接各模式块的管路要尽可能短。

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  • davidchen820927

    第9楼2010/05/18

    对,是人参皂苷,你应该做这类物质很有经验吧。再请教你一下:人参皂苷是用正离子还是负离子模式?我做的扫描结果是在流动相为75%乙腈-25%10mM醋酸铵时负离子强度较正离子大,而且文献很多都是用的醋酸铵负离子条件,我有点疑惑,按常理来讲,酸性条件选正离子,碱性条件选负离子,醋酸铵显酸性,应该正离子多,是不是该调ph值至碱性?
    另外,人参皂苷为甾核类物质,极性不大,可否用APCI做,是不是比ESI更好?

    bigpalewolf(bigpalewolf) 发表:双通的死体积应该比柱子大吧?而且没有富集作用。

    拖尾应该是LC的问题,如果是人参皂苷的话可以试试改变一下流动相。

    另外你的柱温多大!?增加一下热交换会不会好点!?

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  • davidchen820927

    第10楼2010/05/18

    大侠们辛苦了,看你们回帖时间都在早上上班前或凌晨,敬佩啊

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