在线讲座27期:AB SCIEX 质谱技术及在应用分析领域中的进展
主讲人:AB Sciex 公司市场部产品经理 赵贵平
时间:2010年5月24日——6月1日
AB SCIEX 2010/05/31
[quote]原文由 [b]frappuccino(frappuccino)[/b] 发表: 请问赵贵平老师: 1.AB公司的6种增强型的扫描方式,是否会产生不同于常规MRM的离子,是否能得到可靠的裂解规律支持。结果是否有裂解理论支持。 2.贵公司所说的同时定性又定量,有点奇怪。要定量的时候不就必须先定性准确了吗?若定性不准怎能谈得上定量呢?所以贵公司的仪器应该是只能得到较多的“离子信息”。 3.贵公司的仪器一直不提你机器的离子传输效率。大家都知道,如果质谱中的离子得不到很好的传输。离子在质谱中无名状的消失,则会严重的影响定量研究。而且AB无论哪种增强模式,均采用了类似离子阱的“离子富集方式”。众所周知,离子阱的离子传输效率低于传统的四级杆,所以这样的仪器设计方式能达到定量优于传统的QQQ的效果吗? 4.贵公司一直使用仪器上的一些参数进行宣传,请问你们那些参数是不是计算方法和其他公司不一致。那你们还拿你这些数据与其他公司进行对比。你们的仪器维修成本怎样?全国的工程师水平怎样,技术服务是否能跟上呢?[/quote] 您好 1 AB SCIEX公司的6种增强型扫描方式,只有在QTRAP系统中有,而这个系列共有三个产品分别是3200QTRAP。4000QTRAP,QTRAP 5500,这三个产品,它们首先是三重四极杆串联质谱,具有串联四极杆质谱的所有扫描功能,其二级质谱碎裂规律完全得到质谱裂解理论的支持。 2 同时定性定量分析是基于AB SCIEX的QTRAP产品,具体讲就是用其独特的扫描方式“MRM-IDA-EPI”,一次进样可同时得至MRM的定量色谱峰和相应的二级质谱数据。而常规的串联四极杆质谱只能得到MRM的两对离子的色谱峰,而定性是仅靠两离子的比值,这样可能会有假阳问题 3 离子传输效率问题是所有质谱系统的最核心技术,其实从样品离子化到离子传输到Q0其输传效率都不到10%,现在所讲的离子传输效率是指从Q0到检测器的离子传输效率,从您讲的内容看,可能还不清楚AB SCIEX公司的QTRAP系统的结构,它首先是一台串联四极杆质谱,线性离子阱扫描,只是的Q3上多加了几路电场后,具有的扫描功能,如果不用到TRAP功能,它就是一台纯粹的串联四极杆质谱系统。 4 AB SCIEX 公司的质谱产品不与其它公司的产品进行参数上的比较,数据的稳定性,可靠性,灵敏度以及系统长期的耐用性是公司的目标,而售后的维护技术支持,应用技术支持现在都是一流的。 谢谢您的参与,欢迎参加明天的讲座
风肃 2010/05/28
[b][color=#f10b00][size=3]AB Sciex 公司市场部产品经理 赵贵平先生,您好!我有以下问题想请教。 请问: [/size][/color][/b][size=4]1. LC/MS/MS使用时,一般需要优化的参数有哪些? 2. 优化参数的步骤有没有比较经验化的程序来指导呢? 3. APCI和ESI参数优化时分别需要注意哪些问题? [/size] [size=4][color=#013add][size=2][font=宋体]赵[/font][/size][size=2][font=宋体]老师答:[/font][/size][/color][size=2][font='Times New Roman'] [/font][/size][color=#013add][size=2][font=Arial]20[/font][/size][size=2][font=宋体]、由于各家公司的离子源设计不同[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]需要优化的参数可能有些不同[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]对于[/font][/size][size=2][font=Arial]AB SCIEX[/font][/size][size=2][font=宋体]公司的质谱系统来说[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]主要优化的参数有[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]雾化气[/font][/size][size=2][font=Arial]GS1,GS2, [/font][/size][size=2][font=宋体]电离电压[/font][/size][size=2][font=Arial]IS,[/font][/size][size=2][font=宋体]碰撞能量[/font][/size][size=2][font=Arial]CE,[/font][/size][size=2][font=宋体]去簇电压[/font][/size][size=2][font=Arial]DP,[/font][/size][size=2][font=宋体]雾化气温度等[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [color=#013add]21[/color][/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]、[/font][/size][size=2][font=Arial]AB SCIEX[/font][/size][size=2][font=宋体]公司的质谱优化参数可以全自动进行[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]您只提供目标物的母离子就可以了[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [color=#013add]22[/color][/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]、主要是选择好相应的流速[/font][/size][size=2][font=Arial],APCI (1000nl/min),ESI (200nl/min)[/font][/size][/color][size=2][font='Times New Roman'] [/font][/size][/size]
happydog2004 2010/05/24
赵贵平老师好! 请问: 1.硬电离(EI)与软电离(ESI)的二级质谱得到的分子片段相关数据有何区别?在未知物的质谱解析过程,通过高分辨质谱获得精确分子量后,如何判断可能的分子式?需要注意哪些问题(氮规则、不饱和度、同位素峰簇等)? 2.LC/MS是否也有谱库可查询或参阅? 3.反相HPLC较早出峰的组分(极性较强)通过MS获取分子量时需要注意哪些问题?流动相中含有少量挥发性缓冲盐(如醋酸铵等)会对溶质分子的电离有何影响?如何避免基质效应? [color=#013add][font=宋体]赵[/font][font=宋体]老师[/font][size=2][font=宋体]答:[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [color=#013add]1[/color][/font][/size][color=#013add][font=宋体]、[/font][size=2][font=Arial]EI[/font][/size][size=2][font=宋体]和[/font][/size][size=2][font=Arial]ESI[/font][/size][size=2][font=宋体]的二级质谱图没有在的区别[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]都是将所选的母离子在碰撞室通过加一能量和惰性气体进行碎裂[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]离分辨质谱通过获得其准确质荷比以及相应的同位素分布[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]可以计算出其分子组成[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]并不需要氮规则[/font][/size][size=2][font=Arial]/[/font][/size][size=2][font=宋体]不饱和度信息[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]但在用高分辨质谱进行分子组成计算时[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]一定要保证其质荷比精确在[/font][/size][size=2][font=Arial]2ppm[/font][/size][size=2][font=宋体]以内[/font][/size][/color][color=#013add][size=2][font=Arial], 2[/font][/size][font=宋体]、[/font][size=2][font=宋体]目前[/font][/size][size=2][font=Arial] LC/MS[/font][/size][size=2][font=宋体]还没有共公的质谱数据库[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]因为现在各家质谱公司的离子源设计都不一样[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]所以电离参数也就不同[/font][/size][/color][color=#013add][size=2][font=Arial]. 3[/font][/size][font=宋体]、[/font][size=2][font=Arial]HPLC/MS[/font][/size][size=2][font=宋体]中极性大的物质会在前面出峰[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]一般情况下[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]保证其保留时间大于二倍死体积时间[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]应该没有任何问题[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]流动相中有少量[/font][/size][size=2][font=Arial]([/font][/size][size=2][font=宋体]小于[/font][/size][size=2][font=Arial]10mM[/font][/size][size=2][font=Arial])[/font][/size][size=2][font=宋体]挥发性缓冲盐大多数情况下是为了[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]解决分离问题[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]但也可能会影响到电离[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]在正离子方式[/font][/size][size=2][font=Arial]:[/font][/size][size=2][font=宋体]缓冲盐一般比目标物碱性弱就行[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]负离子方式[/font][/size][size=2][font=Arial]:[/font][/size][size=2][font=宋体]目标物酸性比缓冲盐强就好[/font][/size][/color][color=#013add][size=2][font=Arial]. LC/MS/MS[/font][/size][size=2][font=宋体]的基质效应是一个永恒的问题[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]避免基质效应的方法现在大多采用更严格的前处理方法[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]如果仪器的灵敏足够好[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]可以选择最简单的办法[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]就是稀释样品到浓度很低还能检测到[/font][/size][size=2][font=Arial].[/font][/size][/color]
frappuccino 2010/05/27
请问赵贵平老师: 1.AB公司的6种增强型的扫描方式,是否会产生不同于常规MRM的离子,是否能得到可靠的裂解规律支持。结果是否有裂解理论支持。 2.贵公司所说的同时定性又定量,有点奇怪。要定量的时候不就必须先定性准确了吗?若定性不准怎能谈得上定量呢?所以贵公司的仪器应该是只能得到较多的“离子信息”。 3.贵公司的仪器一直不提你机器的离子传输效率。大家都知道,如果质谱中的离子得不到很好的传输。离子在质谱中无名状的消失,则会严重的影响定量研究。而且AB无论哪种增强模式,均采用了类似离子阱的“离子富集方式”。众所周知,离子阱的离子传输效率低于传统的四级杆,所以这样的仪器设计方式能达到定量优于传统的QQQ的效果吗? 4.贵公司一直使用仪器上的一些参数进行宣传,请问你们那些参数是不是计算方法和其他公司不一致。那你们还拿你这些数据与其他公司进行对比。你们的仪器维修成本怎样?全国的工程师水平怎样,技术服务是否能跟上呢? [color=#013add][size=2][font=Arial][font=宋体]赵[/font][font=宋体]老师答:[/font] 1[/font][/size][size=2][font=宋体]、[/font][/size][size=2][font=Arial]AB SCIEX[/font][/size][size=2][font=宋体]公司的[/font][/size][size=2][font=Arial]6[/font][/size][size=2][font=宋体]种增强型扫描方式,只有在[/font][/size][size=2][font=Arial]QTRAP[/font][/size][size=2][font=宋体]系统中有,而这个系列共有三个产品分别是[/font][/size][size=2][font=Arial]3200QTRAP[/font][/size][size=2][font=宋体]。[/font][/size][size=2][font=Arial]4000QTRAP[/font][/size][size=2][font=宋体],[/font][/size][size=2][font=Arial]QTRAP 5500[/font][/size][size=2][font=宋体],这三个产品,它们首先是三重四极杆串联质谱,具有串联四极杆质谱的所有扫描功能,其二级质谱碎裂规律完全得到质谱裂解理论的支持。[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [color=#013add]2[/color][/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]、同时定性定量分析是基于[/font][/size][size=2][font=Arial]AB SCIEX[/font][/size][size=2][font=宋体]的[/font][/size][size=2][font=Arial]QTRAP[/font][/size][size=2][font=宋体]产品,具体讲就是用其独特的扫描方式[/font][/size][size=2][font=Arial]“MRM-IDA-EPI”[/font][/size][size=2][font=宋体],一次进样可同时得至[/font][/size][size=2][font=Arial]MRM[/font][/size][size=2][font=宋体]的定量色谱峰和相应的二级质谱数据。而常规的串联四极杆质谱只能得到[/font][/size][size=2][font=Arial]MRM[/font][/size][size=2][font=宋体]的两对离子的色谱峰,而定性是仅靠两离子的比值,这样可能会有假阳问题[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [color=#013add]3[/color][/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]、离子传输效率问题是所有质谱系统的最核心技术,其实从样品离子化到离子传输到[/font][/size][size=2][font=Arial]Q0[/font][/size][size=2][font=宋体]其输传效率都不到[/font][/size][size=2][font=Arial]10%[/font][/size][size=2][font=宋体],现在所讲的离子传输效率是指从[/font][/size][size=2][font=Arial]Q0[/font][/size][size=2][font=宋体]到检测器的离子传输效率,从您讲的内容看,可能还不清楚[/font][/size][size=2][font=Arial]AB SCIEX[/font][/size][size=2][font=宋体]公司的[/font][/size][size=2][font=Arial]QTRAP[/font][/size][size=2][font=宋体]系统的结构,它首先是一台串联四极杆质谱,线性离子阱扫描,只是的[/font][/size][size=2][font=Arial]Q3[/font][/size][size=2][font=宋体]上多加了几路电场后,具有的扫描功能,如果不用到[/font][/size][size=2][font=Arial]TRAP[/font][/size][size=2][font=宋体]功能,它就是一台纯粹的串联四极杆质谱系统。[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [color=#013add]4[/color][/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]、[/font][/size][size=2][font=Arial]AB SCIEX [/font][/size][size=2][font=宋体]公司的质谱产品不与其它公司的产品进行参数上的比较,数据的稳定性,可靠性,灵敏度以及系统长期的耐用性是公司的目标,而售后的维护技术支持,应用技术支持现在都是一流的。[/font][/size][/color]
hongys1019 2010/05/28
[b][color=#f10b00][size=3]AB Sciex 公司市场部产品经理 赵贵平先生,您好!我有以下问题想请教。 请问:[/size][/color][/b]离子阱质谱与四级杆质谱的最大区别是什么?各大公司的产品之间有什么区别? [color=#013add][font=宋体]赵[/font][font=宋体]老师答:[/font][/color][font=Arial] [/font][size=2][font=宋体][color=#013add]离子阱质谱和四极杆质谱的最大区别是扫描方式有诸多不同[/color][/font][/size][size=2][font=Arial] [/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]离子阱质谱扫描方式包括全扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]子离子扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]分辨扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]选择离子扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]多级扫描[/font][/size][/color][color=#013add][size=2][font=Arial](N=10) [/font][/size][size=2][font=宋体]串联四极杆质谱扫描方式包括全扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]子离子扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]母离子扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]中性丢失扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]选择离子扫描[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]多反应检测扫描[/font][/size][/color][size=2][font=Arial] [/font][/size][size=2][font=宋体][color=#013add]扫描方式不同就决定了它们的应用领域不同[/color][/font][/size][size=2][font=Arial] [/font][/size][color=#013add][size=2][font=宋体]由于我是[/font][/size][size=2][font=Arial]AB SCIEX[/font][/size][size=2][font=宋体]公司的[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]所以在这[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]就各家公司的产品的区别不便发表评论[/font][/size][size=2][font=Arial],[/font][/size][size=2][font=宋体]谢谢[/font][/size][/color]
〓疯子哥〓
第1楼2010/05/24
课程提纲简介
〓疯子哥〓
第2楼2010/05/24
本期在线讲座视频地址:
http://www.instrument.com.cn/webinar/v/100584.htm
本期讲座答疑部分_视频地址
http://www.instrument.com.cn/webinar/v/100585.htm
以下为部分PPT内容,欢迎大家提问,如果想了解更新的内容,请报名参加本次讲座~
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〓疯子哥〓
第6楼2010/05/24
总结
• 当样品基质复杂,样品前处理困难时,用LC/MS/MS进行定量定性检测,可能会受到极大挑战.
– 首先是由于样品基质复杂会给色谱分离造成极大困难
– 其次是当用MRM进行检测时,由于样品基质问题,可能会造成内源性物质的干扰.
– 最后是内源性物质可能在相应的保留时间上出峰,从而造成假阳性结果,如前面举的四个不同领域食品安全检测的实例
• 美国应用生物系统公司QTRAP系统独有的MRM-IDA-EPI质谱采集技术,不仅能满足食品安全检测定量测试高灵敏度的要求,而且能同时给出定量限浓度下的EPI二级质谱数据以进行完全的定性确认要求。
• 随着该类案例的增多,QTRAP系统显现出独一无二的巨大优势。
〓疯子哥〓
第7楼2010/05/24
用户问题汇总:(不断更新中)
1、硬电离(EI)与软电离(ESI)的二级质谱得到的分子片段相关数据有何区别?在未知物的质谱解析过程,通过高分辨质谱获得精确分子量后,如何判断可能的分子式?需要注意哪些问题(氮规则、不饱和度、同位素峰簇等)?
2、LC/MS是否也有谱库可查询或参阅?
3、反相HPLC较早出峰的组分(极性较强)通过MS获取分子量时需要注意哪些问题?流动相中含有少量挥发性缓冲盐(如醋酸铵等)会对溶质分子的电离有何影响?如何避免基质效应?
4、有的农药环境(土壤、水)中在环境中可发生降解、请问有哪些农药可以检测其在环境中的代谢产物?
5、据说AB的碰撞气是5个9的高纯氮气,但这里所说的5个9是指什么?有的人说是纯度要达到5个9,而现实中的常用的氮气发生器(膜分离原理)和液氮所产生的氮气都不可能达到5个9。有的人(多半是氮气发生器销售商说)说5个9是洁净度,而纯度只要在两个9即可,这样的说法对吗?
6、ESI源离子化时会发生基质增强,其原理是什么?
7、质量分析器如何辨认不同的质荷比?
8、糖苷类化合物会发生中性丢失(质荷比是162)。尿液中某些物质,在代谢途径中结合了葡萄糖苷,一般测定这些物质的方法是用葡萄糖苷酸酶水解去掉葡萄糖苷,如果不水解,这类物质的葡萄糖苷会被打掉吗?
9、如何理解定义线性离子阱和离子阱串联?
10、四级杆串联与多级离子阱串联技术各自发展情况?
11、质谱是很好的定性方式,我现在用某一品牌的质谱,定量效果效果非常不好,不知AB在这方面有哪些优势?
12、AB的质谱是大家公认的,但在联用方面,如液相就选UPLC,气相就选安捷伦的,不知贵公司有没有改进或战略?
13、AB公司的6种增强型的扫描方式,是否会产生不同于常规MRM的离子,是否能得到可靠的裂解规律支持。结果是否有裂解理论支持。
14、贵公司所说的同时定性又定量,有点奇怪。要定量的时候不就必须先定性准确了吗?若定性不准怎能谈得上定量呢?所以贵公司的仪器应该是只能得到较多的“离子信息”。
15、贵公司的仪器一直不提你机器的离子传输效率。大家都知道,如果质谱中的离子得不到很好的传输。离子在质谱中无名状的消失,则会严重的影响定量研究。而且AB无论哪种增强模式,均采用了类似离子阱的“离子富集方式”。众所周知,离子阱的离子传输效率低于传统的四级杆,所以这样的仪器设计方式能达到定量优于传统的QQQ的效果吗?
16、贵公司一直使用仪器上的一些参数进行宣传,请问你们那些参数是不是计算方法和其他公司不一致。那你们还拿你这些数据与其他公司进行对比。你们的仪器维修成本怎样?全国的工程师水平怎样,技术服务是否能跟上呢?
17、离子阱质谱与四级杆质谱的最大区别是什么?各大公司的产品之间有什么区别?
18、我在用UPLC-MS(三重四级杆),ESI源,MRM监测时,是否可以同时监测正负源?因为我要检测的几种物质中有的用正源离子化效果好,而有的用负源好。
19、LC/MS/MS在纺织品检测领域的用途如何?我所了解的是有用于致敏致癌染料以及一些表面活性剂的检测!谢谢!
20、1LC/MS/MS使用时,一般需要优化的参数有哪些?
21、优化参数的步骤有没有比较经验化的程序来指导呢?
22、APCI和ESI参数优化时分别需要注意哪些问题?
23、我们单位刚刚买了一台AB 4000Q Trap质谱。最近做了三聚氰胺回收率实验,同时也用气质做了,气质衍生之前的处理和液质基本上是一样的,考虑到衍生化的效率问题,按理说应该是液质做下来回收率会更高一些。可是我们做了几次液质的回收率都只有80%,气质却达到95%。您能帮我分析一下原因吗?
happydog2004
第9楼2010/05/24
赵贵平老师好!
请问:
1.硬电离(EI)与软电离(ESI)的二级质谱得到的分子片段相关数据有何区别?在未知物的质谱解析过程,通过高分辨质谱获得精确分子量后,如何判断可能的分子式?需要注意哪些问题(氮规则、不饱和度、同位素峰簇等)?
2.LC/MS是否也有谱库可查询或参阅?
3.反相HPLC较早出峰的组分(极性较强)通过MS获取分子量时需要注意哪些问题?流动相中含有少量挥发性缓冲盐(如醋酸铵等)会对溶质分子的电离有何影响?如何避免基质效应?
赵老师答:
1、EI和ESI的二级质谱图没有在的区别,都是将所选的母离子在碰撞室通过加一能量和惰性气体进行碎裂
离分辨质谱通过获得其准确质荷比以及相应的同位素分布,可以计算出其分子组成,并不需要氮规则/不饱和度信息,但在用高分辨质谱进行分子组成计算时,一定要保证其质荷比精确在2ppm以内,
2、目前 LC/MS还没有共公的质谱数据库,因为现在各家质谱公司的离子源设计都不一样,所以电离参数也就不同.
3、HPLC/MS中极性大的物质会在前面出峰,一般情况下,保证其保留时间大于二倍死体积时间,应该没有任何问题,流动相中有少量(小于10mM)挥发性缓冲盐大多数情况下是为了,解决分离问题,但也可能会影响到电离,在正离子方式:缓冲盐一般比目标物碱性弱就行,负离子方式:目标物酸性比缓冲盐强就好.
LC/MS/MS的基质效应是一个永恒的问题,避免基质效应的方法现在大多采用更严格的前处理方法,如果仪器的灵敏足够好,可以选择最简单的办法,就是稀释样品到浓度很低还能检测到.