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【讨论】紫外光谱吸收强度随时间衰减的因素?

紫外可见分光光度计(UV)

  • 请教:如题,有机物的紫外光谱在最大特征吸收位置,吸收强度随时间逐渐衰减,可能原因是什么?
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  • xing-xing

    第1楼2010/06/14

    有机物是否不稳定,易分解或氧化
    应按照方法,统一时间检测

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  • 老化验工

    第2楼2010/06/15

    请考虑测定的酸碱条件对样品的稳定性影响,考虑样品是否存在光分解的缓慢趋势,考虑样品在溶液中是否存在结构的缓慢变化,包括被空气氧化的问题。

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  • Utopia

    第3楼2010/06/15

    有机物在该溶液中稳定,测试温度稳定,分子结构中存在分子间氢键,恕不便上传结构。

    附上衰减曲线:

    计时起点为-2min只是为了将开始显著衰减的时间定为0,溶液配制后要立即测量,否则可能测不到-2min到0min这段。

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  • 老化验工

    第4楼2010/06/15

    估计是氢键的原因。以前我做过胶原蛋白+氯化钙的圆二色光谱动力学曲线,混合液的CD光谱的倒峰(或称负峰)会随时间延续而下移,而测定胶原与氯化钙/磷酸盐缓冲溶液时,倒峰又不断上移,一个合理的解释就是:钙离子与酰胺基存在微弱的络合作用,导致螺旋结构中的氢键削弱,螺旋结构逐渐变得松驰,从而出现CD谱的有序变化,当生成钙盐沉淀时,这种氢键削弱的作用又不断减小,螺旋结构不断复原(这些研究结果也发了篇好文章)。以此类推测,你的现象是不是与氢键也有关系呢?

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  • tutm

    第5楼2010/06/15

    楼主的吸光度都在2以上,溶液太浓了,稀释3-4倍再测测看。

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  • Utopia

    第6楼2010/06/16

    呵呵,有道理,但是溶液稀了效果就不显著了,我也觉得是氢键的作用,新溶液放置过程中,氢键逐步形成吧,但是,总觉得这个解释比较表面化,感觉似乎还有层窗户纸没有戳破。

    tutm(tutm) 发表:楼主的吸光度都在2以上,溶液太浓了,稀释3-4倍再测测看。

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  • Utopia

    第7楼2010/06/16

    你的意见很有参考价值,非常感谢!

    zlhuang0132(zlhuang0132) 发表:估计是氢键的原因。以前我做过胶原蛋白+氯化钙的圆二色光谱动力学曲线,混合液的CD光谱的倒峰(或称负峰)会随时间延续而下移,而测定胶原与氯化钙/磷酸盐缓冲溶液时,倒峰又不断上移,一个合理的解释就是:钙离子与酰胺基存在微弱的络合作用,导致螺旋结构中的氢键削弱,螺旋结构逐渐变得松驰,从而出现CD谱的有序变化,当生成钙盐沉淀时,这种氢键削弱的作用又不断减小,螺旋结构不断复原(这些研究结果也发了篇好文章)。以此类推测,你的现象是不是与氢键也有关系呢?

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  • pfz1985

    第8楼2010/06/17

    吸光度是太大了,稀释下

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  • 锐飏

    第9楼2010/06/17

    稀释稀释,严重要求改变这种测试方法,想问一下作者为什么要求这么高的浓度?

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  • xtoridt

    第10楼2010/06/18

    吸光度最好不要超过0.8

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