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【求助】关于沙门菌检测中四硫磺酸钠亮绿培养基

woshilian

2010/09/25

食品毒素/微生物检测

我们按2010版中国药典做沙门菌检查时，阳性实验做到胆盐硫乳琼脂和麦康凯琼脂上划线，怎么做都没法检出有菌落生长。

后来为了查出原因，我们分别作了几个操作：

1.按药典步骤一步一步进行，先是肉汤，接种了沙门后培养24h后在胆盐硫乳上划线，同时也取肉汤培养物1ml接种至四硫磺酸钠亮绿培养基中，培养24h后在胆盐硫乳和麦康凯琼脂上划线。此实验的结果是，肉汤至胆盐硫乳上划线长出了菌落中心带黑色有的全部黑色的菌落，而由四硫磺酸钠亮绿培养基划线，什么菌落都没长。估计是四硫磺酸钠亮绿培养基出了问题，但是我们不知道问题所在，于是又往下做。

2.按药典现在肉汤中培养后转至四硫磺酸钠亮绿培养基，我们将四硫磺酸钠亮绿培养基的成分一一分开（四硫磺酸钠亮绿培养基是由四硫磺酸钠培养基中添加碘试液和亮绿试液所得，都按药典操作的），也就是，只用四硫磺酸钠培养基、添加了碘试液而未添加亮绿试液的四硫磺酸钠培养基、添加了亮绿而未添加碘试液的四硫磺酸钠培养基以及四硫磺酸钠亮绿培养基，培养24h后在胆盐硫乳和麦康凯上划线，发现四硫磺酸钠培养基和添加了碘试液而未添加亮绿试液的四硫磺酸钠培养基都长出了具有沙门菌特征的菌落，而添加了亮绿而未添加碘试液的四硫磺酸钠培养基和四硫磺酸钠亮绿培养基中未长出任何菌落。

结果显示的是只要培养基中添加了亮绿就没法检出，不知道是不是亮绿出了问题。但是，所有步骤都是按药典中进行的，亮绿试液和碘试液的配制都是的，相当的让人想不通。

究竟药典中设四硫磺酸钠亮绿培养基的意图只是增菌作用，还是也有选择作用，那后便胆盐硫乳和麦康凯不一样能鉴别么，四硫磺酸钠亮绿培养基这一步究竟有多大作用呢，可是药典出来了，又不可能不按其操作，毕竟客户都不明白其中的因果额。

唉~~，所以啊，又得麻烦大家了，有什么见解都给分析一下哈，多多益善，谢谢大家了^^

分
该帖子已被版主-牛牛加1积分，加2经验;加分理由:欢迎来微生物版块！

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牛牛

第1楼2010/09/26

四硫磺酸钠亮绿培养基是在营养肉汤预增菌后的又一次增菌，因为菌种在经过冷冻/加热等一系列操作后，会给尚在生存的菌致成亚致死损失，如果只增一次菌往往不易得到阳性结果。但是四硫磺酸钠亮绿培养基不单单是增菌，其中的亮绿是有抑菌作用的，它可抑制革兰阳性菌的生长。而沙门氏菌是革兰阴性菌，如果你所培养的菌种到这步加亮绿不生长，不加亮绿就生长的话就应该怀疑你所复活的菌种是否成功，或者你所保留的菌斜面是否已被污染。

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woshilian

第2楼2010/09/30

^^非常感谢。
可是为什么从没有亮绿的四硫磺酸钠培养基转到胆盐硫乳上长出具有沙门菌特征的菌落呢？

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牛牛

第3楼2010/09/30

你首先应该做进一步的确认，确认你所培养出来的确实是沙门氏菌才可以，不能单看菌落特征像就怀疑，只有能肯定它确实是以后才可以考虑其他问题
woshilian(woshilian) 发表:^^非常感谢。
可是为什么从没有亮绿的四硫磺酸钠培养基转到胆盐硫乳上长出具有沙门菌特征的菌落呢？

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wj2591332

第4楼2012/11/21

亮绿不是有很多种吗，我想问下TTB里加的亮绿有没有具体要求？能不能提供下具体的CAS号啊？

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