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【求助】低聚糖的HPLC分析

液相色谱(LC)

  • 我的样品是水溶的单糖或低聚糖,种类应该不复杂,大概7种以内,最多可能有四碳糖,但包含其他小分子植物次生代谢物。需要知道其中糖的种类和相对含量。

    这种情况适合用HPLC分析吗?如果需要用糖柱,请问有没有国产糖柱可以推荐,价格大概是多少?
    是否也可以衍生后用GC-MS分析,相对HPLC是麻烦还是会方便一些?
    新手上路,问题多多,还望各位不吝赐教,越详细越好。
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  • johne0212

    第1楼2010/09/29

    可以用HPLC来做就是看你用什么样的检测器了,HPLC-RID,HPLC-ELSD和HPLC-CAD,HPAEC-PAD这四种都可以来做,前三种是普通液相配备氨基正相色谱柱,方法在市面上有很多,流动相主要是ACN:water,靠水来洗脱糖,普通的氨基柱就可以来做,一般价格在2000-4000一根,但是正相柱使用寿命相对较低.

    后面一种方法是也是液相一种演变过来的,但是用的是亲和色谱柱,主要代表是戴安的离子色谱体系配置脉冲电化学检测器.这种方法做糖的灵敏度相对较高,但是整个色谱体系维护起来比较麻烦,生手最好别用,并且检测器用的是脉冲电化学,电极是金或者铂金,极易磨损,价格较贵,另外,戴安在离子交换体系做糖最著名的应该是他的糖柱,戴安的柱子一根10000rmb很正常.所以如果你对检测要求不高可以用HPLC-RID,就可以了,如果你多聚糖含量较高,推荐你参考AOAC做多糖的方法,用HPAEC-PAD

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  • arctos

    第2楼2010/09/29

    多谢回复.
    另外,普通分析纯试剂(单糖,多糖)可以用作HPLC的标准品吗?

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  • johne0212

    第3楼2010/09/29

    我肯定是不会同意你用分析纯来做标准品的,Sigma这些单糖的标准品也不贵的,不至于用分析纯的,另外,一些多糖的标准品都有水分含量你最好称重的时候扣掉纯度和水分的那部分.

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  • arctos

    第4楼2010/09/29

    多谢, 虽然写得不多, 但足够清楚。

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