【求助】梯度洗脱设置问题

应助达人

1、你的A、B分别是哪一个流动相？
2、先把系统中的纯有机相用10%甲醇置换后就可以走你的梯度了。清洗系统是分别用10%甲醇和纯甲醇1.0流速，清洗一个小时就行了。
3、进样前先进一个空白，空白进一个就够了，但建议进空白前先预运行完整个梯度过程。

甲醇太少，建议不低于5%，以免损伤柱子。如果觉得保留太弱，不如换C18的柱子

A是0.05mol/l的磷酸盐缓冲液，B是甲醇

我看了高压输液泵的说明书，上面写到用了缓冲液后还要连接柱塞清洗流路 清洗柱塞，难道清洗系统的过程没有清洗到柱塞吗？
还有使用了手动进样器，还要冲洗进样口，方法是：用注射器将纯水打入，同时扳动进样阀数次，每次数毫升。一般是六通进样阀吧？这句话“同时扳动进样阀数次”这个该怎么扳动使纯水不进入色谱柱啊？

我看了你曾经发过的关于液相维护的帖子，中间写到“手动进样器的清洁 先用10%甲醇“LOAD”、“INJECT”各冲洗5ml，再用甲醇置换。”是先扳到LOAD，注入5ml，再扳到INJECT，注入5ml；在INJECT位置，液体直接绕过环路流出了废液管，那在LOAD位置，液体怎么流出去啊？

LOAD位置进入定量环，INJECT位置进入色谱柱，有什么问题吗？

应助达人

少量纯水进入反相色谱柱没关系，但如果是硅胶柱肯定不能进水。

应助达人

7725i接有两根废液管，其中LOAD位置时，除了滞留在定量环中的，其它多余的从6号排液管排出，INJECT位置清洗时，废液直接5号废液管排出，不进入色谱柱。
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20090410/1831254/

恩，谢谢版主，关于这个，现在没啥问题了，剩下的问题是梯度设置了，