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【求助】液相测定 应该加些什么试剂?

液相色谱(LC)

  • 液相色谱检测问题

    >我想做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url],但是我的样品遇酸会水解,这下问题就来了
    \> 1.能否不加酸(三氟乙酸)直接测,能不能分离开呢
    \> 2.如果需要增加表面疏水性(我的样品表面是氨基和羧基),那我应该加些什么试剂才能推迟流出时间呢
    请高人指教啊!
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  • tyrone

    第2楼2010/11/02

    这个样品是什么也没有交代,这个让大家给建议是不是有点为难呢?

    第一个问题,对于分析型液相色谱来说,是分离检测,至于样品是以什么状态被检测不是很重要,但是要保证在你的流动相条件样品是一种状态存在,比方说你的样品遇酸会分解,没关系啊,只要它是一种状态存在也行,至于能否不加算直接测要看是什么样品。
    第二个问题,对于亲水的样品,在反相柱上保留较弱,可以去调节流动相的pH值以改变样品的保留,对于酸性样品来说可以通过降低流动相的pH值增大保留,而对于碱性样品来说,理论上可通过增大流动相的pH值增大保留,但是pH值的增大是有范围的,硅胶基质的色谱柱能承受的最高pH值是8

    rock09277(rock09277) 发表:液相色谱检测问题

    >我想做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url],但是我的样品遇酸会水解,这下问题就来了
    \> 1.能否不加酸(三氟乙酸)直接测,能不能分离开呢
    \> 2.如果需要增加表面疏水性(我的样品表面是氨基和羧基),那我应该加些什么试剂才能推迟流出时间呢
    请高人指教啊!

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  • 该帖子已被版主-〓猪哥哥〓加4积分,加2经验;加分理由:详细
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  • andyerlee

    第3楼2010/11/02

    加酸与否要看你的样品的性质,如果遇酸水解成什么状态,是否只有一种状态,如果是则能否在同一条件下测定
    氨基和羧基都是亲水基团,也可改变流动相的比例来增大保留

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  • 〓猪哥哥〓

    第4楼2010/11/03

    为什么要加酸。只要你样品Pka适当就不用加。

    调节比例调整保留时间

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  • rock09277

    第5楼2010/11/03

    样品是用表面带氨基的物质,然后加入一种酸酐与表面上的部分氨基反应,生成一种带有羧基的样品,形成的酰胺键在弱酸性条件下容易水解,所以不能加三氟乙酸,怎样能推迟流出时间

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  • rock09277

    第6楼2010/11/03

    样品是用表面带氨基的物质,然后加入一种酸酐与表面上的部分氨基反应,生成一种带有羧基的样品,形成的酰胺键在弱酸性条件下容易水解,所以不能加三氟乙酸,怎样能推迟流出时间

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  • rock09277

    第7楼2010/11/05

    以前没有测过,这是第一次测试,昨天做了下试了试,甲醇和水为流动相,什么都加,出峰时间在20分钟左右,可以分开,但是有拖尾现象。打算再去试试,加三乙胺的甲醇和水的流动相,看看效果怎么样。

    样品在弱酸性条件下分解,pH>7.4才不会分解,以前没有测过,这是第一次测试,昨天做了下试了试,甲醇和水为流动相,什么都加,出峰时间在20分钟左右,可以分开,但是有拖尾现象。打算再去试试,加三乙胺的甲醇和水的流动相,看看效果怎么样。

    请教大家!

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