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【求助】waters 1525泵,2998PDA检测器使用问题

液相色谱(LC)

  • 各位高手,请教问题,仪器waters 1525泵,2998PDA检测器,717自动进样器,同一个样品,同一个条件,不同时间段跑(9月与11月),得出的色谱图一样,峰面积不变,但是保留时间,11月的月9月分的比,滞后10多分钟,不知道为何。同一时间内的多次重复,保留时间没变化,但是不知道为何,前后使用会差这么大?等度洗脱,而且是先混合好了的,跑的一个流动相,溶剂过滤器也是有清洗过的。请各位给出解释。

    测了一下1525泵的流速,两个泵都没问题,混合也没问题,也不知道到底是什么原因了。另外,学生做实验亦跟新买的waters e2695做了对比,同样的条件,e2595分离度好一些,出峰时间也差了5,6分钟。同种样品,在不仪器上,保留时间是不太可能完全一样,但是差别5,6分钟,也是不太正常。郁闷中。。

    另外,说明书中归结保留时间不稳定的原因,如下:
    1,流量不正确
    2,洗脱不正确
    3,色谱柱温度变化
    4,色谱柱不正确
    5,泵头有气泡
    6,洗脱液过滤器堵塞。

    哎,请各位告诉再帮忙分析一下吧,谢谢了
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  • johne0212

    第1楼2010/12/01

    流动相没有配置的问题的话,仪器可能出现的问题就是泵了,你可以手动测试一下泵的流速是不是准确,一个秒表,一个5ml的容量瓶。

    关键还是找一下柱子的原因吧。

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  • tce921

    第2楼2010/12/01

    柱子是一根新的,工程师说waters1525混合器会有点问题,可是我用的流动相先混合好了的,不存在呀。那我明天测一下那个流速吧,流速不准确,是单向阀的问题吧?

    johne0212(johne0212) 发表:流动相没有配置的问题的话,仪器可能出现的问题就是泵了,你可以手动测试一下泵的流速是不是准确,一个秒表,一个5ml的容量瓶。

    关键还是找一下柱子的原因吧。

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  • Vigorous

    第3楼2010/12/01

    差10分钟。。。你确定方法完全一样么?别像我那样第一次用的是乙腈,第二次用的是甲醇,差出10分钟来。你检查一下你的流动相对不对。别的条件能差出10分钟可能性不大

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  • tce921

    第4楼2010/12/02

    条件完全一样的,所以很奇怪,我今天去测测流速是否准去先。

    Vigorous(liuzhenhua87913) 发表:差10分钟。。。你确定方法完全一样么?别像我那样第一次用的是乙腈,第二次用的是甲醇,差出10分钟来。你检查一下你的流动相对不对。别的条件能差出10分钟可能性不大

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  • dony1985

    第5楼2010/12/02

    这问题。。。
    首先要看看柱压的变化
    如果柱压有明显下降,那就是柱子出问题了。
    柱效降低,柱压就会下降,保留时间自然也就提前了。

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  • tce921

    第6楼2010/12/02

    柱子压力变化不大,用其他仪器测过,没有太大差别,而且是新柱子,应该不至于这么快就柱效降低了的。

    dony1985(dony1985) 发表:这问题。。。
    首先要看看柱压的变化
    如果柱压有明显下降,那就是柱子出问题了。
    柱效降低,柱压就会下降,保留时间自然也就提前了。

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  • 风烟

    第7楼2011/01/25

    流动相中有机相的比例,流动相新鲜与否,泵的实际流速,柱子的活化程度,样品中的酸碱度影响,都会影响到您的某种物质的保留时间。

    逐一的排查一下吧。祝您好运!

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  • simon1130

    第8楼2011/03/07

    要求柱温么?不要求的话可以考虑一下环境温度

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  • flyingdna

    第9楼2011/03/13

    楼主,如果还是找不到原因,建议给waters打8008202676免费电话咨询一下吧。

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  • movei

    第10楼2011/03/13

    流动相是你事先自己手动混合好的吗?这样有差异是正常的呀。还有环境温度也会有影响

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