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【求助】sunfireC18 4.6*250mm走完蜂蜜样品后柱压升得很高!

  • dadoudou12
    2010/12/02
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我们的液相是WATERS2695。这根sunfireC18 4.6*250mm 5微米 柱子微米一直用于防腐剂和甜味剂的检测(主要是山梨酸,苯甲酸,安赛蜜,糖精钠等)。走的流动相都是高比例乙酸铵水溶液。不过柱压一直维持在2200PSI左右,算是正常的。
    前些天要做蜂蜜中的羟甲基糠醛,按照标准流动相是甲醇比水=10:90,柱温30°,压力2400PSI。进了一针标样,5个蜂蜜样品,峰形很漂亮,样品也是按标准来处理的(10克定容到100毫升),样品峰也不杂,蛮干净。整个过程走下来都很正常。然后快到下班时间了,我设置了关机程序,柱温关了,用流动相洗40分钟,然后逐渐过渡到0.2流速的甲醇,最后停留在这个状态洗过夜的。第二天早上来的时候发现柱压不正常了,0.2流速的甲醇,压力都到600PSI了,按平时的话200多点PSI,我就不明白了,难道是什么东西堵了?然后继续用这个流速的甲醇冲了1天1夜。后来咨询了做过蜂蜜的朋友,说要用高比例的水洗,我又换回流动相了,调到0.2的流速洗了1天1夜,压力还是只升不降,最后换了乙腈,流速设置成1洗了1天,最后调到了0.2洗过夜。现在还在洗中,这到底是出什么问题了,我以前做的样品都不脏的,都是酒啊什么的。我不相信柱子就被5个蜂蜜样品堵了。难道就这样没救了?

    各位大侠,给点意见吧,我一定要救回这根柱子,这柱子性能不错的,一般的东西峰形很漂亮的,可以用完美对称来形容。

    最后问个问题:我的检测器是2489,都说冲柱子的时候可以不接检测器,但是我今天看了下检测器的构造,不行啊,柱子和检测器连接的细铁丝不知道连在检测器内部的哪个地方,旋开那块挡板也是拔不出的啊。被挡牢的,怎么办呢?
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  • johne0212

    第1楼2010/12/02

    您做实验真认真,柱子都是有寿命的,有时候救不了就别救了。你可以试着用传统的冲柱子方法最后一次活化一下这根您“宝贵”的Sunfire,不过Waters柱子就是好,就是贵呀。

    一般来讲,我们不推荐在用纯有机试剂比如乙晴等长时间冲柱子还带检测器,因为柱子上有大量的脏东西会被带入检测池,检测池脏了或者堵了就不是一根柱子的问题了。

    我知道您的意思,因为Waters连接检测池和柱子的管路是在检测池里面呢,你可能找不到接口,你可以备一根多余的管路吗,直接绕过检测器接到柱子上就可以了。

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  • dadoudou12

    第2楼2010/12/03

    但这柱子用了没几次呢。我只是想找找有没有哪个地方是我操作失误引起的。

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  • sacid

    第3楼2010/12/03

    蜂蜜中是不是存在少量的杂蛋白呢?蛋白变性了,挂在柱子上就不好办了。
    还有,那个羟甲基糠醛会不会聚合什么的呢?

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  • dadoudou12

    第4楼2010/12/03

    蜂蜜应该没有蛋白质吧,应该有氨基酸
    羟甲基糠醛就算要聚合,也不至于在柱子里聚合吧。否则这聚合也太容易发生了吧。

    sacid(sacid) 发表:蜂蜜中是不是存在少量的杂蛋白呢?蛋白变性了,挂在柱子上就不好办了。
    还有,那个羟甲基糠醛会不会聚合什么的呢?

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  • wangkun0538

    第5楼2010/12/03

    压力升高是很正常的事,我的柱子经常是第二天做的压力比前一天高,这可能与样品有关,也可能是保护柱脏了,换个保护柱芯压力就明显降下来了。

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  • 〓猪哥哥〓

    第6楼2010/12/03

    蜂蜜是很浓稠的东东。有机溶剂不太溶解,粘性增大。用大比例的水或者温水冲洗试试看

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  • 青橙

    第7楼2010/12/04

    要是分析比较脏的东西 还是用上预柱比较好
    同意楼上的,可以试试用高比例的水冲柱子时把柱温调高,另外,可以配点酸溶液来冲柱子,前提是保证pH别低于柱子的耐受范围。在冲洗一些无机和有机杂质的时候,酸还是很管用的。我以前就用过。

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  • dadoudou12

    第8楼2010/12/05

    好的,我试试。

    青橙(chengf3526) 发表:要是分析比较脏的东西 还是用上预柱比较好
    同意楼上的,可以试试用高比例的水冲柱子时把柱温调高,另外,可以配点酸溶液来冲柱子,前提是保证pH别低于柱子的耐受范围。在冲洗一些无机和有机杂质的时候,酸还是很管用的。我以前就用过。

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  • nnsss

    第9楼2010/12/06

    更换筛板是最后的办法

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  • dadoudou12

    第10楼2010/12/06

    单独能换个筛板么?买得到?

    nnsss(nnsss) 发表:更换筛板是最后的办法

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