皮皮鱼
第2楼2011/02/11
可以.但有一些问题必须先弄明白.
1、柱容量与检测器线性范围是完全不同的两回事,互相之间不影响。
2、进样量增加,对柱容量和检测器的线性范围分别造成不同的考验,但对结果的影响方式也完全不同。
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检测器线性范围,是指到达检测器的组分量与检测器信号之间成正比关系时,最高值与最低值的比。或者粗略的理解为:单位时间内到达检测器的样品中某个组分的总量,在一个范围内,与检测器产生的信号大小成正比。这个范围,就是线性范围(其实是线性区间)。
柱容量,是指进样量中某组分含量由于色谱柱过载造成的峰展宽达到10%峰宽,这时的进样量为柱容量.
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也就是说,当进样量变大时,样品首先在色谱柱内超载,造成色谱峰展宽,这个展宽的程度,由柱容量决定。柱容量越小,展宽越厉害,峰宽越大。
同时,大进样量造成单位时间到达检测器的组分量增加,检测器也有可能超载,造成响应值偏低。
这2者并无直接联系,柱子超载与否由柱子本身性能决定,检测器超载与否由检测器性能决定。但2者也有联系,如果柱子超载严重,将造成组分峰严重展宽,峰高下降,那么单位时间到达检测器的组分量的峰值就要下降,检测器就不容易超载了。也就是说,你柱子越超载,我检测器反倒更不容易超载。
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检查检测器是否超载,有个简单办法,就是看检测器的响应值,或者说是外标法的校正因子。超载后,响应值变低,校正因子会增加。检测器超载越厉害,校正因子就越高。用同一个标样,不断增加进样量来标定色谱仪,当以峰面积为基础的校正因子开始显著增加时,就是检测器已经超载了。
检查色谱柱是否超载,也有个简单办法,就是看色谱峰的峰宽。用同一个标样,不断增加进样量来标定色谱仪,当以色谱峰的峰宽开始显著增加时,就是色谱柱已经超载了。
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当然你如果无法控制进样量大小,比如定量环,可以不断增加样品中某个组分的浓度,来获得同样的效果。
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从这个角度看,间接反映,还是可以做到的。但为什么不直接看峰宽呢?
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当然毛细管柱不超载的时候很少,基本都在超载状态下工作,只要分得开,超载就超载吧,反倒不容易造成检测器超载。也正是因此,毛细管柱的检测器,极少发生超载。
nayinna
第4楼2011/02/11
噻,讲得很明白啊
谢谢皮皮鱼指点!!!
还想问:若直接用峰宽衡量,宽到什么程度算是超载呢?有没有个量的界限?
谢谢!!!
皮皮鱼
第5楼2011/02/15
柱子超载会造成色谱峰变宽,但其本身不会造成定量准确度变差,当然前提条件是色谱峰面积能够得到正确积分.如果峰型变差的厉害,导致积分不准确,那另当别论.
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检测器超载则必然导致定量准确性变差,同时峰宽虽然不发生明显展宽,但峰顶明显会出现圆头峰或锯齿峰.
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所以色谱柱超载是一定程度上允许的,但检测器超载是绝对不允许的.一但发现检测器有超载现象,超载峰的面积和峰高都不能作为定量的依据. 即外标法测定这个组分,或者所有的归一化法,都不能得到正确结论.遗憾的是,据我了解,检测器超载却仍然用超载峰定量的情况,在很多实验室都有存在.
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检测器超载虽然仅仅是检测器性能,但由于工作中检测器本身总是和色谱仪固化在一起,因此检测器本身的线性范围已经不能用来衡量色谱仪的整体性能,而测试中表现出来的,是整个色谱仪在检测器的表象. 同样的样品,直接给到检测器可能会超载,但经过色谱柱展宽,甚至柱超载的严重展宽之后,可能就不超载了.本来可以检出的低浓度,由于柱子的正常展宽或者超载后的严重展宽,可能就检不出了.
所以我们通常说都是色谱仪的检出限和色谱仪的线性范围,而不是检测器的.这样说比较切合实际一点,考虑了进样口\色谱柱\连接死体积等因素对检测器实际性能造成的影响.但有时候我们也粗略的认为这就是检测器检出限和线性范围......当然我们现在应该知道这里面存在一个很大差异.