去年冬天 2011/03/11
方法名称: 北草乌--生物碱含量测定--HPLC法 应用范围: 确定其主要生物碱含量,以供用药参考 方法原理: 北草乌根粉分别以不同溶剂,采用不同提取方法进行提取,提取液经[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分离,在235nm处测定峰面积,外标法计算含量。 仪器设备及实验条件: 仪器设备 日本岛津公司LC-10A [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]带SPD-M10A 二极管阵列紫外检测器和CLASS-LC10 工作站;ZFQ-5旋转蒸发仪(天津玻璃仪器厂);8893E-MT 超声波清洗器(美国Coli-Parmer) 色谱条件 ODS柱(25mm×4.6mm),流动相:甲醇-水-乙腈(67:33:2),内含6mmol/lSDS,0.02mol/lNaH2PO4),流速:1.0ml/min,检测波长:235 nm 试样制备: 对照品溶液的配制 准确称取新乌头碱3.0mg,次乌头碱2.7mg,乌头碱2.4mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得. 供试品溶液的配制 分别取8份过6 目标准筛的北草乌根粉各200g盛于2500ml的细口瓶中,四份用于溶剂浸提,4份用于溶剂超声辅助浸提。分别加10%氨水300ml,放置2h充分浸润,然后分别两两加入1000ml苯、氯仿、乙醇、乙醚作为浸提溶剂,溶剂浸提时间为12h,每隔1h用力振摇,使分散均匀,当进行6h后,倾出溶剂,重新补加1000ml溶剂;超声辅助浸提两次,每次各 1h,并不时用力振摇,当进行1h后,倾出溶剂,补加另1000 ml 溶剂,继续超声辅助浸提,浸提结束后,过滤,于旋转蒸发器上将溶液浓缩,回收溶剂,用2%的盐酸萃取4次,合并萃取液,加浓氨水调pH值至9,产生白色絮状沉淀,静止过滤后,干燥恒重得乌头生物碱.。取总乌头碱10.8mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得。 操作步骤: 分别精密吸取试品溶液10μl,按上述色谱条件测定,外标定量法计算样品中北草乌生物碱的含量。
wsy18 2011/03/11
上海月旭的柱子还不错,可以到月旭版面看看,请他们帮你推荐下,或许还可以请他们帮你做个试验。 月旭版面的链接:http://bbs.instrument.com.cn/forum_595.htm
hu_2104411 2011/03/11
好柱子多了,看你自己方法用哪种,你们没有旧柱子吗,可以先试试。我[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]只用W的,从symmetry到Xterra到Xbridge,相当好,特别粒度5u的,柱压低,柱效也高
去年冬天
第3楼2011/03/11
方法名称:
北草乌--生物碱含量测定--HPLC法
应用范围:
确定其主要生物碱含量,以供用药参考
方法原理:
北草乌根粉分别以不同溶剂,采用不同提取方法进行提取,提取液经液相色谱分离,在235nm处测定峰面积,外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
仪器设备 日本岛津公司LC-10A 液相色谱仪带SPD-M10A 二极管阵列紫外检测器和CLASS-LC10 工作站;ZFQ-5旋转蒸发仪(天津玻璃仪器厂);8893E-MT 超声波清洗器(美国Coli-Parmer)
色谱条件 ODS柱(25mm×4.6mm),流动相:甲醇-水-乙腈(67:33:2),内含6mmol/lSDS,0.02mol/lNaH2PO4),流速:1.0ml/min,检测波长:235 nm
试样制备:
对照品溶液的配制 准确称取新乌头碱3.0mg,次乌头碱2.7mg,乌头碱2.4mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得.
供试品溶液的配制 分别取8份过6 目标准筛的北草乌根粉各200g盛于2500ml的细口瓶中,四份用于溶剂浸提,4份用于溶剂超声辅助浸提。分别加10%氨水300ml,放置2h充分浸润,然后分别两两加入1000ml苯、氯仿、乙醇、乙醚作为浸提溶剂,溶剂浸提时间为12h,每隔1h用力振摇,使分散均匀,当进行6h后,倾出溶剂,重新补加1000ml溶剂;超声辅助浸提两次,每次各 1h,并不时用力振摇,当进行1h后,倾出溶剂,补加另1000 ml 溶剂,继续超声辅助浸提,浸提结束后,过滤,于旋转蒸发器上将溶液浓缩,回收溶剂,用2%的盐酸萃取4次,合并萃取液,加浓氨水调pH值至9,产生白色絮状沉淀,静止过滤后,干燥恒重得乌头生物碱.。取总乌头碱10.8mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得。
操作步骤:
分别精密吸取试品溶液10μl,按上述色谱条件测定,外标定量法计算样品中北草乌生物碱的含量。