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【求助】发现随着时间的后移，其吸光度在不断减小。

crystadlzhuzi

2011/03/29

化学药检测

穿心莲总内酯紫外分光光度法测定

穿心莲总内酯的紫外检测方法很少，最近查了一篇，过程如下：精密取穿心莲提取液（以活性炭去除叶绿素）适量，加20%乙醇液2ml，加2%3，4-二硝基苯甲酸1ml，加2%KOH1ml，摇匀，静置15min，以60% 甲醇定容至10ml，于550nm波长处测定吸光度。

在对供试液进行测定时，分别于显色后的6，8，10，12，14，16，18..............40 min 测定，发现随着时间的后移，其吸光度在不断减小。

而文献资料上要求静置15min后测定，请问这是什么原因？谢谢！

分
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gzgaoling

第1楼2011/03/29

我认为，如果反应生成的有色物质不会随时间变化，就不会有反应时间的要求了。

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青林

第2楼2011/03/29

静置15min，使其反应完全！

一般都是及时检测，不能过很久才测。那样OD肯定会改变的！

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神话

第3楼2011/04/03

能排除仪器的因素吗?
crystadlzhuzi(crystadlzhuzi) 发表:穿心莲总内酯紫外分光光度法测定

穿心莲总内酯的紫外检测方法很少，最近查了一篇，过程如下：精密取穿心莲提取液（以活性炭去除叶绿素）适量，加20%乙醇液2ml，加2%3，4-二硝基苯甲酸1ml，加2%KOH1ml，摇匀，静置15min，以60% 甲醇定容至10ml，于550nm波长处测定吸光度。

在对供试液进行测定时，分别于显色后的6，8，10，12，14，16，18..............40 min 测定，发现随着时间的后移，其吸光度在不断减小。

而文献资料上要求静置15min后测定，请问这是什么原因？谢谢！

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神话

第4楼2011/04/03

这个样品没有做过,15分钟应该是反应最完全的时间,静止时间过长是否有道理呢

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