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【求助】有没有人做过磷脂酰胆碱的测定啊?

液相色谱(LC)

  • 本人要检测大豆磷脂里面的磷脂酰胆碱
    按GB/T 21493-2008方法检测
    高效液相法,正相
    Si 60柱子,250mm*4.6mm,5μm
    流动相:正己烷:异丙醇:1%冰醋酸=8:8:1
    流速1ml/min,柱温30度,波长205
    但是走了两个小时
    对照都没有出峰
    因为之前很少做正相
    找不到问题的原因
    请各位前辈指点一下!
    万分感谢!
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  • 老多_小多

    第1楼2011/05/11

    严格照条件走的吗?
    再仔细检查下仪器是否有异常

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  • 〓猪哥哥〓

    第2楼2011/05/11

    流动相有没有配准确?
    按照标准方法,不会出现不出峰

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  • tianru的爸爸

    第3楼2011/05/12

    你的对照品的含量够吗?
    用205nm检测,需要的量不少。
    首先是浓度要高,最好是干粉对照品用流动相去直接溶解,或者用正己烷去溶解,然后再用流动相稀释,最好浓度到1mg/ml以上。
    然后就是上样量也要多些,上20微升以上。
    这样保证上样量能够高些。

    条件应该首先可以出峰的,否则很难写进标准的。
    再有就是柱效不够了。流动相配错的可能性不大,

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  • guangcai1980

    第4楼2011/05/13

    怎么没有用蒸发光呀!我们用的是,很好的检测!

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  • poppyzl

    第5楼2011/05/18

    是严格按国标做的,就是不知道问题出在哪儿,因为很少做正相,也不知道怎么改善

    老多_小多(emoc98311) 发表:严格照条件走的吗?
    再仔细检查下仪器是否有异常

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  • poppyzl

    第6楼2011/05/18

    严格按国标做的
    而且换了多个流动相比例,也是不行

    〓小猪猪〓(03yx2) 发表:流动相有没有配准确?
    按照标准方法,不会出现不出峰

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  • poppyzl

    第7楼2011/05/18

    用的是2mg/ml的对照,换过柱子,还是不出峰,前辈做过吗?大概什么时候出峰呢

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:你的对照品的含量够吗?
    用205nm检测,需要的量不少。
    首先是浓度要高,最好是干粉对照品用流动相去直接溶解,或者用正己烷去溶解,然后再用流动相稀释,最好浓度到1mg/ml以上。
    然后就是上样量也要多些,上20微升以上。
    这样保证上样量能够高些。

    条件应该首先可以出峰的,否则很难写进标准的。
    再有就是柱效不够了。流动相配错的可能性不大,

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  • poppyzl

    第8楼2011/05/18

    但是国标上不是用蒸发光,按理说既然写进标准,应该能做出来,但是我做就是没有峰,找不到原因啊。。。
    前辈可否把您做的条件说一下

    guangcai1980(guangcai1980) 发表:怎么没有用蒸发光呀!我们用的是,很好的检测!

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  • stld-7853

    第9楼2011/07/11

    请问一下,蒸发光要什么条件呢,我也要测磷脂,想测溶血磷脂,请教一下大概的条件怎样,也是用正相测的么?

    guangcai1980(guangcai1980) 发表:怎么没有用蒸发光呀!我们用的是,很好的检测!

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  • lijuangang

    第10楼2015/09/17

    请问楼主问题解决没?可否共享一下?

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