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弱弱的请教一个低级问题(血清火焰测定)

  • 獸醫Mr.Nie
    2011/09/25
  • 私聊

原子吸收光谱(AAS)

  • 本人新手,使用原子吸收仪器不到一个月时间。所使用的仪器是耶拿nov400。

    这段时间用火焰法测血清中的铁、铜、锰、锌。血清用1%硝酸稀释至10ml直接上机(由于血清样品有限,取样量为500ul-800ul不等)。

    由于是新手,只能按照商家推荐的方法条件进行。其中,铁和铜的标准曲线,按6个梯度配制,分别为0.3ug/ml 0.6ug/ml 0.9ug/ml 1.2ug/ml 1.5ug/ml 1.8ug/ml,参照说明书操作步骤顺利的测出了铁和铜。

    因为血清中锰和锌含量比较低,所以测锰和锌的时候就遇到问题了。

    如果按0.3ug/ml 0.6ug/ml 0.9ug/ml 1.2ug/ml 1.5ug/ml 1.8ug/ml的梯度配制锌和锰的标准曲线,检测时提示结果低于标准曲线最低点。

    于是按0.05ug/ml 0.1ug/ml 0.2ug/ml 0.3ug/ml 0.4ug/ml 0.5ug/ml的梯度配制锰和锌的标准曲线,但是,做标准曲线的时候,进0.05ug/ml 、0.1ug/ml 这两个梯度的时候,吸光度为负值,直到进0.2ug/ml 0.3ug/ml 0.4ug/ml 0.5ug/ml的时候才为正值。

    请问论坛的各位专家老师,这是不是调零和空白的原因?

    仪器调零,是不是该用超纯水调零?

    标准曲线0点,是用超纯水?还是该用样品空白?
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  • ldgfive

    第1楼2011/09/25

    应助工程师

    血清里有些元素的含量有可能就是很低的

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  • 秋月芙蓉

    第2楼2011/09/25

    LZ很谦虚,其实你的问题不低级
    一般仪器的灵敏度变化不会太大,对于低含量的样品,如血清中的铁、铜、锰、锌,建议LZ减少稀释倍数,以提高测定的样液浓度

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  • 秋月芙蓉

    第3楼2011/09/25

    仪器调零,一般用配标的稀硝酸

    标准曲线0点,一般用1%硝酸

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  • xuyijing

    第4楼2011/09/25

    滄海無涯(niehao) 发表:本人新手,使用原子吸收仪器不到一个月时间。所使用的仪器是耶拿nov400。

    这段时间用火焰法测血清中的铁、铜、锰、锌。血清用1%硝酸稀释至10ml直接上机(由于血清样品有限,取样量为500ul-800ul不等)。

    由于是新手,只能按照商家推荐的方法条件进行。其中,铁和铜的标准曲线,按6个梯度配制,分别为0.3ug/ml 0.6ug/ml 0.9ug/ml 1.2ug/ml 1.5ug/ml 1.8ug/ml,参照说明书操作步骤顺利的测出了铁和铜。

    因为血清中锰和锌含量比较低,所以测锰和锌的时候就遇到问题了。

    如果按0.3ug/ml 0.6ug/ml 0.9ug/ml 1.2ug/ml 1.5ug/ml 1.8ug/ml的梯度配制锌和锰的标准曲线,检测时提示结果低于标准曲线最低点。

    于是按0.05ug/ml 0.1ug/ml 0.2ug/ml 0.3ug/ml 0.4ug/ml 0.5ug/ml的梯度配制锰和锌的标准曲线,但是,做标准曲线的时候,进0.05ug/ml 、0.1ug/ml 这两个梯度的时候,吸光度为负值,直到进0.2ug/ml 0.3ug/ml 0.4ug/ml 0.5ug/ml的时候才为正值。

    请问论坛的各位专家老师,这是不是调零和空白的原因?

    仪器调零,是不是该用超纯水调零?

    标准曲线0点,是用超纯水?还是该用样品空白?

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  • xuyijing

    第5楼2011/09/25

    在曲线前面再加一个点啊,0ug/ml

    xuyijing(xuyijing) 发表:

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  • 桌子下面少个八

    第6楼2011/09/26

    1。最好先把各个元素的仪器检出限做出来。
    2。测出的样品是零或者是负的,有可能是因为样品中实际浓度很低,已经超出你的检出限了。这时要考虑实验要求的限值,如果低于检出限可以接受,报告直接写小于检出限就行了。(比如<1pmm)
    3。如果需要再精确,采用2楼秋月版主的建议不错。

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  • 悠旸

    第7楼2011/09/26

    六楼说的很有道理,坚信自检的测样过程没有问题,不必为负值苦恼。

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  • wmj31

    第8楼2011/09/27

    进0.05ug/ml 、0.1ug/ml 这两个梯度的时候,吸光度为负值,直到进0.2ug/ml 0.3ug/ml 0.4ug/ml 0.5ug/ml的时候才为正值?进0.05ug/ml 、0.1ug/ml 这两个梯度的时候,是进的锰标准溶液?你的灵敏度这么低?推荐的吸光度是多少?我这个仪器0.5ug/ml的吸光度有0.06左右。可以检查下提升量是否正常。
    标准曲线0点,可用超纯水,也可用标准空白。

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