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进空针要出峰,问题解决了,结果大跌眼镜。。。

液相色谱(LC)

  • 仪器型号:岛津LC-20AT、SIL-20A、SPD-20A、CTO-20A

    最近在做一个药品的处方筛选工作,主要考察的是有关物质和含量,有关物质的溶剂与流动相一致,但是在分析过程中,在2-3min左右总会出现一个峰面积在15000左右的正峰,大概进样次数在400次左右后仍然存在,而且大小基本不变。
    直接进样流动相,该峰存在且峰面积变化不大。
    在仪器用甲醇冲洗的时候,待基线平稳以后进样甲醇,还是在同样的保留时间出现一个峰,但是峰面积可达到5w。
    更换柱子,用异丙醇冲洗自动进样器的样品流路也没有什么改善。
    某次进样流动相,其量是平时分析的十倍,那个峰面积也相应增大十倍左右。

    测定波长228nm,流动相是甲醇-0.01M磷酸二氢铵(pH3.5)(70:30)

    请问是什么原因呢?谢谢。

    =================我是心碎成一片一片的分割线===================

    今天工程师过来维修了(略去飞贵的费用不谈)
    他折腾了一个多小时,最后得出的结论是这样的
    我们的机器自带的系统脱气机的脱气效果太好了,但是因为样品没有办法彻底脱气。
    所以,那个峰是由没有脱气的任何试剂带进来的
    而且在低波长下尤为显著。

    非常感谢各位这段时间对我问题的关注,深度鞠躬!
  • 该帖子已被版主-石头底下的蛐蛐加5积分,加2经验;加分理由:欢迎问题解决后回来反馈,希望分数加的还不晚
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  • yanggang8661

    第1楼2011/10/09

    是不是管道或检测器有气泡

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  • xizhi

    第2楼2011/10/09

    应该是指你溶样的溶剂以及进样管路里的流动相,这些出峰是不可避免的,因为它们与方法里在运行的流动相成份(涉及到有机相比例以及缓冲盐)是不一样的,所以会在检测器下出现吸收峰。这个不必在意,如果真想避免是不可能的,但可以通过调节检测器波长改变吸收大小

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  • wanruq

    第3楼2011/10/09

    这个怎么检查呢?
    管道都脱气过很多次了。。。

    主要是峰面积的大小与进样量关联比较大
    这个也可能是由气泡引起的?

    yanggang8661(yanggang8661) 发表:是不是管道或检测器有气泡

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  • wanruq

    第4楼2011/10/09

    我进样的液体组成和流动相组成完全一致
    换用甲醇冲洗系统的时候也是进样的甲醇
    也就意味着换了流动相,进样流动相还是要出峰
    这个是怎么回事呢?

    xizhi(xizhi) 发表:应该是指你溶样的溶剂以及进样管路里的流动相,这些出峰是不可避免的,因为它们与方法里在运行的流动相成份(涉及到有机相比例以及缓冲盐)是不一样的,所以会在检测器下出现吸收峰。这个不必在意,如果真想避免是不可能的,但可以通过调节检测器波长改变吸收大小

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  • liufeilzu

    第5楼2011/10/10

    调整自动进样器的进样方式吧

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  • xizhi

    第6楼2011/10/10

    进样流动相与系统里正在运行的流动相是有吸收的差异,这种差异就体现在出现了溶剂峰

    wanruq(wanruq) 发表:我进样的液体组成和流动相组成完全一致
    换用甲醇冲洗系统的时候也是进样的甲醇
    也就意味着换了流动相,进样流动相还是要出峰
    这个是怎么回事呢?

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  • wanruq

    第7楼2011/10/10

    今天给岛津的工程师打电话询问
    他们觉得可能是属于甲醇被污染了
    我换了进口的甲醇之后进空针还是有个很大的吸收峰(流动相为甲醇,进样也用甲醇),峰面积在5w左右

    求高人指点啊

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  • wanruq

    第8楼2011/10/10

    请问可以详细说明一下吗?谢谢啊~

    liufeilzu(liufeilzu) 发表:调整自动进样器的进样方式吧

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  • wanruq

    第9楼2011/10/11

    今天为了验证下是不是甲醇的问题,换了一台仪器跑甲醇进空针
    结果是没有大峰出现。
    也就是说问题应该不是出在甲醇上

    现在的问题是
    1.跑流动相,进空针有峰,峰面积是1w5左右
    2.跑甲醇,进空针,有峰,峰面积为5w左右
    3.跑乙腈,进空针,仅有2个很小的峰,峰面积在一千以下
    4.换机器,跑甲醇,进空针,无峰,仅有基线的波动

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  • 晨曦

    第10楼2011/10/11

    是否是自动进样器的进样口密封垫导致的呢?可以尝试着去更换一个进样口密封垫试试。

    wanruq(wanruq) 发表:今天为了验证下是不是甲醇的问题,换了一台仪器跑甲醇进空针
    结果是没有大峰出现。
    也就是说问题应该不是出在甲醇上

    现在的问题是
    1.跑流动相,进空针有峰,峰面积是1w5左右
    2.跑甲醇,进空针,有峰,峰面积为5w左右
    3.跑乙腈,进空针,仅有2个很小的峰,峰面积在一千以下
    4.换机器,跑甲醇,进空针,无峰,仅有基线的波动

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