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【极限体验】Ultimate XB-C18柱全程监测某样品酶水解反应(10月份)

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    2011/10/29
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厂商论坛

  • Ultimate XB-C18柱全程监测某样品酶水解反应

    【发贴背景】
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111022/3600437/

    此贴中提到了京尼平苷的酶水解,非常顺利地完成了任务。
    这次是另一个葡萄糖苷类化合物,也选择酶水解,可是结果。。

    【样品结构】
    此样品共连有4个β-D-glucose,整个化合物是中心对称化合物(R基团是一个中心对称的结构,具体不透露了)
    样品结构的结构通过1H-NMR、13C-NMR、MS进行了确认,具体如下图所示:


    【仪器试剂】
    水:重蒸水
    甲醇:色谱纯,天津大茂
    HPLC:Waters 高效液相
    Waters 996 DAD检测器
    Waters Model 600 controller
    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url]

    【色谱条件】
    色谱柱:Ultimate XB-C18柱(5μm, 4.6x250mm)
    流动相:甲醇/水(V:V)梯度洗脱
    0min---------------50%
    10min-------------60%
    15min-------------70%
    20min-------------80%
    25min-------------90%
    30min------------100%
    流速:1.0ml/min
    柱温:柱温箱30度
    检测波长:440nm(没写错)
    进样量:随意(确实是随意)


    【实验过程】
    基本过程都在图片上






    有个小错误,此图应该是:T1和T2基本不变







    【结果与讨论】
    1. 转化过程推测:转化的方式可能很多种,不过T3是不连葡萄糖的苷元形式,这个应该不成问题。T1、T2具体如何转化,需要进一步确定。

    2. 在转化的过程中,由于失去葡萄糖,使得化合物极性变小,导致在水中溶解度下降而析出。这是水解反应进行到一定时间,反应速度严重降低的原因。从结果可以看去,要水解掉一个或者两个葡萄糖是很简单的,而且反应速度极快。但是要彻底水解成苷元形式,这是非常困难的,至少需要大量的时间(贴子中提到480min后,反应仍然只进行了一部分)。

    3. T1和T2好像都带有一个“卫星峰”,推荐可能是R基团结构不太稳定,构型发生变化而产生的异构体,具体有待进一步确认。

    4. Ultimate C18柱对于此类化合物峰形良好,分离度优秀,柱压低且稳定。作为一根色谱柱,它做到了自己应尽的义务,它光明坦荡,它勤劳务实,它兢兢业业,它……Ultimate XB-C18柱,色谱柱中的战斗机,Oh,yeah!!!
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  • arvid2007

    第2楼2011/10/29

    kaikaifeng月末又推出一新力作啊

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  • yuduoling

    第3楼2011/10/29

    期待拜读kaikaifeng的大作

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    第4楼2011/10/30

    力作。。。汗,就是实验数据

    arvid2007(arvid2007) 发表:kaikaifeng月末又推出一新力作啊

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    第5楼2011/10/30

    大作也不敢。。平时实验做得比较多,整理整理就是体验

    yuduoling(yuduoling) 发表:期待拜读kaikaifeng的大作

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    第6楼2011/10/30

    基本编辑完成了,本来打算再弄几个转化曲线的
    若10月作品太多,此作品就放到11月吧

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    第7楼2011/10/30

    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111024/3602723/
    原创打假啦,哈哈哈

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  • arvid2007

    第8楼2011/10/30

    你也来打打假,发挥你寻宝的超强能力

    头像更新中,请稍候…(kaikaifeng) 发表:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111024/3602723/
    原创打假啦,哈哈哈

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  • dahua1981

    第9楼2011/10/30

    应助达人

    kaikaifeng的大作
    不参加原创有点可惜了

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  • 社区=冬季=

    第10楼2011/10/30

    你小心被修饰了

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