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电泳电流问题

  • wangruiting
    2011/11/10
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 大家好 我用相同的电泳条件 电流每天都不一样 很不稳 而且 这几天每一天的电流都比前一天大 这是什么原因呢
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  • nini2006

    第1楼2011/11/10

    CE的重现性本身就比较差,要想每天情况完全一致难度比较大。只要波动范围不是很离谱就无所谓。你说的很不稳定大概偏差多少?当然,你要确保毛细管的温度每天一致,每天冲洗毛细管所用的试剂顺序时长要一致。

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  • feng861024

    第2楼2011/11/10

    毛细管的电流跟湿度及使用的缓冲液的离子浓度关系比较大,这个没啥关系的。

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  • wangruiting

    第3楼2011/11/11

    偏差在几微安吧 温度是一致的

    nini2006(nini2006) 发表:CE的重现性本身就比较差,要想每天情况完全一致难度比较大。只要波动范围不是很离谱就无所谓。你说的很不稳定大概偏差多少?当然,你要确保毛细管的温度每天一致,每天冲洗毛细管所用的试剂顺序时长要一致。

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  • ericwong

    第4楼2011/11/11

    最好保证每天使用的缓冲液也相同,比如说都是重新配制

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  • nini2006

    第5楼2011/11/11

    几微安似乎有点点大,当然像楼上说的,保持buffer一定,这是常识,估计你不会不懂,必要的话,跑了几小时后更换buffer,以保持离子强度恒定。你再多注意下电泳前的预冲洗(即NaOH,水,buffer的冲洗),尽量保持冲洗时间恒定。

    wangruiting(wangruiting) 发表:偏差在几微安吧 温度是一致的

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  • wangruiting

    第6楼2011/11/11

    是的 每天的缓冲液都是新配的

    ericwong(ericwong) 发表:最好保证每天使用的缓冲液也相同,比如说都是重新配制

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  • wangruiting

    第7楼2011/11/11

    恩 我的缓冲液每天都是新配的 也及时的更换了 不知道是怎么回事 之前换过缓冲液后就出峰了 这次 换后也没有 只有溶剂峰 后来又进很多针 又出峰了 但是重现性不好

    nini2006(nini2006) 发表:几微安似乎有点点大,当然像楼上说的,保持buffer一定,这是常识,估计你不会不懂,必要的话,跑了几小时后更换buffer,以保持离子强度恒定。你再多注意下电泳前的预冲洗(即NaOH,水,buffer的冲洗),尽量保持冲洗时间恒定。

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  • ericwong

    第8楼2011/11/11

    CE电流有多大?
    做的什么样品?用的什么缓冲液?

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  • wangruiting

    第9楼2011/11/11

    做的水果提取物 30mMTris-30mM磷酸二氢钾 电流一般都是30多微安

    ericwong(ericwong) 发表:CE电流有多大?
    做的什么样品?用的什么缓冲液?

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  • moonkingg

    第10楼2012/01/05

    考虑过柱子吗?

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