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进复杂样品对柱子的影响

wangruiting

2011/12/13

液相色谱（LC）

大家好，我做的样品是一种水果，成分比较复杂，样品提取用的甲醇-水回流，文献上大多是这么做的，但是老师担心会对柱子有影响，我每天进完液相后，都用纯甲醇冲洗，的确有东西出来，并且我的流动相体系是缓冲盐，每天都是先冲会甲醇，再用等比例的水-有机相过度，接着用大比例水冲洗，最后用甲醇再冲，不知道这样做有没有问题，也不知道怎样确定是否还有脏东西保留在了柱子里，请大家指教啊！

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tangtang

第1楼2011/12/13

流动相里有缓冲盐，不要先冲甲醇，容易析出。

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yinzongyuan123

第2楼2011/12/13

先用低比例的甲醇冲洗，直接用甲醇，盐就析出来了

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xiaowang268

第3楼2011/12/13

先用低比例的甲醇水体系冲洗，在逐渐加大甲醇含量直到纯甲醇冲柱30min。

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分
该帖子已被版主-zhaohua8011加2积分，加2经验;加分理由:应助

xiaowang268

第4楼2011/12/13

一段时间后，最好用乙腈冲柱一定时间

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wangruiting

第5楼2011/12/13

不用直接用同比例的水和有机相冲洗么？我用的是50%的甲醇
yinzongyuan123(yinzongyuan123) 发表:先用低比例的甲醇冲洗，直接用甲醇，盐就析出来了

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wangruiting

第6楼2011/12/13

好的之前是想先用甲醇冲看看冲出东西来没，那请问盐析出了，主要是在管路里还是在柱子中呢？
yinzongyuan123(yinzongyuan123) 发表:先用低比例的甲醇冲洗，直接用甲醇，盐就析出来了

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wangruiting

第7楼2011/12/13

好，下次就冲，谢谢
xiaowang268(xiaowang268) 发表:一段时间后，最好用乙腈冲柱一定时间

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wangruiting

第8楼2011/12/13

我还想知道的是如何确定柱子中的脏东西都冲出来了呢?

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zhaohua8011

第9楼2011/12/14

先用低比例的有机相，再慢慢升高！

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sunjun0620

第10楼2011/12/14

一般最好先用水冲洗，然后换用甲醇或者是乙腈冲洗，最后在过渡到流动相。经常做复杂样品最好用个预柱，能保护色谱柱。

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