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HPLC常见问题——手动、自动进样阀进样精度差原因

  • true blood
    2012/01/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 岛津工程师讲的,整理一下和大家分享

    一、手动进样面积重复性差原因:
    1 进样量不合适
    2 所用进样针刻度不准
    3 进样针里有起泡
    4 进样口松动,针插不紧
    5 进样针太细,插不紧
    6 转子密封垫脏、磨损或漏液
    7 进样方法不正确

    7725i进样量 :以20ul原配样品环为例,部分注入样品进样体积在5-15ul重现性好,建议10ul
    全部注入样品进样体积以20*4,即80ul重现性好,就是要达到样品环体积4倍以上。

    手动进样步骤
    1 吸样后擦针、排气泡
    2 进样状态(inject)下插针到底部
    3 快速切到装填(load)状态
    4 较快匀速推针杆,注入样品
    5 快速切回inject
    6 拔针

    二、自动进样器进样精度差原因:
    1 自动进样器没有排气(purge),或者排气时间(标准时间25min)不够
    2 排气用清洗液没有了
    3 清洗液没有连接在线脱气机
    4 高压阀转子密封垫磨损或堵塞
    5 进样垫堵塞或磨损
    6 使用了非岛津的瓶及瓶垫来装样品

    purge功能:避免温差或几天没开机造成计量泵的泵头内可能产生气泡造成进样量产生误差
    操作:确认有清洗液,按面板purge键或从软件启动排气,默认25min,自动停止
    清洗液的选择:要与样品互溶,与流动性互溶,不含任何溶质 建议使用50%甲醇水溶液
    自动进样器何时排气:每天分析前、更换清洗液后、重现性不好时
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  • 蓝人

    第1楼2012/01/19

    应助达人

    二、自动进样器进样精度差原因:
    1 自动进样器没有排气(purge),或者排气时间(标准时间25min)不够
    2 排气用清洗液没有了
    3 清洗液没有连接在线脱气机
    4 高压阀转子密封垫磨损或堵塞
    5 进样垫堵塞或磨损
    6 使用了非岛津的瓶及瓶垫来装样品

    purge功能:避免温差或几天没开机造成计量泵的泵头内可能产生气泡造成进样量产生误差
    操作:确认有清洗液,按面板purge键或从软件启动排气,默认25min,自动停止
    清洗液的选择:要与样品互溶,与流动性互溶,不含任何溶质 建议使用50%甲醇水溶液
    自动进样器何时排气:每天分析前、更换清洗液后、重现性不好时


    这个学习了

    自动进样 也不好的原因在这里

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  • supcool

    第2楼2012/01/20

    为楼上补充一点,purge 用液体50%有时候效果不好,建议用3:7或3:7甲醇水,根据流动相来确定,使用时需超声脱气。吸滤头脏时需清洗。

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  • true blood

    第3楼2012/01/20

    装机的时候工程师就说用50%的,我们也没用过别的浓度。呵呵,你的建议我记住了,谢谢!

    supcool(supcool) 发表:为楼上补充一点,purge 用液体50%有时候效果不好,建议用3:7或3:7甲醇水,根据流动相来确定,使用时需超声脱气。吸滤头脏时需清洗。

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  • letianshi

    第4楼2012/01/20

    手动进样误差很大,尤其是用进样针进很少的时候,重复性很差

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  • lhbsx

    第5楼2012/01/23

    进样是个技术活儿,熟能生巧。

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  • supcool

    第6楼2012/01/28

    工程师告诉的,盐浓度大时,1:1会导致重现性很差。

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  • zhaoming0822

    第7楼2012/01/29

    不错,很好的学习!谢谢楼主啦!

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  • xiaowang268

    第8楼2012/01/30

    现在制药企业主要还是以自动进样为主,只有学校的实验室手动进样多些

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  • 千层峰

    第9楼2012/01/30

    手动进样是技术活,很多人搞不好的。。。

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  • true blood

    第10楼2012/01/30

    是啊,所以缓冲液的浓度要尽量低才好

    supcool(supcool) 发表:工程师告诉的,盐浓度大时,1:1会导致重现性很差。

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