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高效液相死体积峰时间问题

液相色谱(LC)

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  • PS:不太清楚该如何描述问题题目,只能写这个了,我写的详细点。请各位大侠帮忙。
    我在做HPLC杂质检测时出现下述情况,请各位帮忙,产品名称是注射用奥沙利铂,高效液相机器是岛津LC-20AT,四元泵的;流动相是PH3.0的磷酸水溶液:乙腈(99.1),也就是用磷酸调PH至3.0;色谱柱:C18,4.6*250,5um;出现情况如下:
    在2.2min左右回出现一个杂质峰,此峰绝大多数情况为最大单杂峰,决定着产品的是否合格,主峰是出在1.5min,主峰计算时是扣除的,计算方法是外标法;但是在原料药的时候2.2min是没有此峰的,原料药2.2min基线是平的,无任何峰产生,在制剂生产中,用到的乳糖在2.2min也是没有的,原料药和制剂的浓度都是一样的,流动相也是一样的,溶剂也是一样的,溶剂是水;在生产过程中,会用氢氧化钠调节PH,会调2次,原料药溶解后调节一次,除碳后再调节一次,氢氧化钠的浓度为0.1mol/l,两次调节会用到50ml左右的氢氧化钠;为此,配制硝酸钠溶液1mg/ml进样后,在2.2min会出峰;后咨询省所老师,说是在生产工艺中产生的,可以扣除,但是我又做了下述实验:在生产中未调节PH,只是原料药和乳糖溶解后取样,进样后发现在2.2min出现杂质峰。
    各位大侠请问一下,此峰是否有可能是死体积造成的峰?或者有没有人知道这个峰如何产生的,在计算时能否去除不带入计算?万分感谢!

tangtang 2012/05/06

如果单进奥沙利铂没有峰,单进乳糖没有峰,混合奥沙利铂和乳糖进样就有峰。那么这个峰不能扣除的。 如果能证明这个峰是氢氧化钠的峰,那么可以扣除。

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  • tangtang

    第1楼2012/05/05

    1.是不是走等度?这个比例太悬殊,应配成混合溶液走等度。

    2.主峰才1.5分钟?可以说没有保留,更换色谱柱试一下。

    3.不排除是奥沙利铂水解后的杂质峰。

    PS:重复发帖要被删除的,

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  • 有水有渝

    第2楼2012/05/05

    应助达人

    奥沙利铂出峰时间这么快吗,调节PH用的是氢氧化钠,为什么你配制硝酸钠溶液1mg/ml进样后?
    建议把乳糖和奥沙利铂分别按生产工艺做一个小样品后进样,看看那个杂质峰谁产生的?

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  • xgs84

    第3楼2012/05/06

    走的是等度的;
    流动相(99:1)我是配制成混合溶液在一个容器里面的,不是用机器混合的;
    奥沙利铂主峰时间是10.5min,不是1.5min。

    tangtang(tangtang) 发表:1.是不是走等度?这个比例太悬殊,应配成混合溶液走等度。

    2.主峰才1.5分钟?可以说没有保留,更换色谱柱试一下。

    3.不排除是奥沙利铂水解后的杂质峰。

    PS:重复发帖要被删除的,

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  • xgs84

    第4楼2012/05/06

    因为我当时没有配制氢氧化钠进样,怕伤柱子。
    我不太清楚您说的做一个小样品进样,能说的具体点吗?谢谢。

    有水有渝(xky0230699) 发表:奥沙利铂出峰时间这么快吗,调节PH用的是氢氧化钠,为什么你配制硝酸钠溶液1mg/ml进样后?
    建议把乳糖和奥沙利铂分别按生产工艺做一个小样品后进样,看看那个杂质峰谁产生的?

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  • tangtang

    第5楼2012/05/06

    如果单进奥沙利铂没有峰,单进乳糖没有峰,混合奥沙利铂和乳糖进样就有峰。那么这个峰不能扣除的。

    如果能证明这个峰是氢氧化钠的峰,那么可以扣除。

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  • xgs84

    第6楼2012/05/08

    你的意思是不是就是说配制氢氧化钠溶液低一点的浓度然后进样,如果在2.2min出现峰,则此峰可以扣除,是这个意思吧?那么理由是什么呢?是不是就是说此峰是在生产中产生的,作为干扰峰呢?谢谢

    tangtang(tangtang) 发表:如果单进奥沙利铂没有峰,单进乳糖没有峰,混合奥沙利铂和乳糖进样就有峰。那么这个峰不能扣除的。

    如果能证明这个峰是氢氧化钠的峰,那么可以扣除。

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  • 有水有渝

    第7楼2012/05/08

    应助达人

    就都按工艺做一次,但只做单一成分,我觉得单进氢氧化钠没有什么意思,除非它对流动相有影响,否则它一般不会有峰。

    xgs84(xgs84) 发表:因为我当时没有配制氢氧化钠进样,怕伤柱子。
    我不太清楚您说的做一个小样品进样,能说的具体点吗?谢谢。

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  • zhaohua8011

    第8楼2012/05/09

    waters上通常认为死体积为1min,你这个出峰太快了!

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  • tangtang

    第9楼2012/05/10

    配成溶液里实际的氢氧化钠浓度进一针看看?

    有关物质检测可以扣除辅料峰。

    xgs84(xgs84) 发表:你的意思是不是就是说配制氢氧化钠溶液低一点的浓度然后进样,如果在2.2min出现峰,则此峰可以扣除,是这个意思吧?那么理由是什么呢?是不是就是说此峰是在生产中产生的,作为干扰峰呢?谢谢

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