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未知红色色素的检测方法

其他色谱仪综合讨论

  • 大家好,最近又遇到一问题,请大家指导:
    我准备从菌体中分离一种红色色素,目前利用乙酸乙酯萃取出来,可通过硅胶柱层析等来分离(正己烷和乙酸乙酯的混合比例可以较好洗脱),因为肉眼可观察到红色;
    但是,如果想通过仪器来稍微定量一下,该怎么操作?也就是说,如何通过仪器来检测该红色色素
    谢谢大家的回复!
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  • geebzbz

    第1楼2012/06/30

    没回复啊,是否发错地方了?期待解决办法中。。。

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  • fengmo4668

    第2楼2012/06/30

    你准备用什么仪器来定量呢?
    先去确定结构吧,
    如果结构确定为已知化合物并且有对照品市售,那么恭喜你,你可以有很多方法来定量;
    如果确定为未发现化合物,那么恭喜你,你发现了一个新化合物。同时向你默哀,因为你接下来会有非常繁重的工作量等着你。这时,定量的问题,先放放再说吧。

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  • geebzbz

    第3楼2012/07/02

    可能是我没说清楚,我说的定量主要是用来在分离这个色素时,检测用的,因为不知道怎么检测,比如用光谱的话,怎么确定这个选择的波长呢?

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:你准备用什么仪器来定量呢?
    先去确定结构吧,
    如果结构确定为已知化合物并且有对照品市售,那么恭喜你,你可以有很多方法来定量;
    如果确定为未发现化合物,那么恭喜你,你发现了一个新化合物。同时向你默哀,因为你接下来会有非常繁重的工作量等着你。这时,定量的问题,先放放再说吧。

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  • fengmo4668

    第4楼2012/07/02

    我说一下我的理解:
    你是想用一个简单的办法,来分辨该如何收集过柱子流下的液体?

    geebzbz(geebzbz) 发表:可能是我没说清楚,我说的定量主要是用来在分离这个色素时,检测用的,因为不知道怎么检测,比如用光谱的话,怎么确定这个选择的波长呢?

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  • geebzbz

    第5楼2012/07/04

    是的,主要就是这个目的,想通过仪器来检测,尤其是如果想利用HPLC之类的分离方法时,如何设定检测波长?谢谢回复啦!

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:我说一下我的理解:
    你是想用一个简单的办法,来分辨该如何收集过柱子流下的液体?

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  • fengmo4668

    第6楼2012/07/04

    最简单、最省时的办法就是TLC。

    找到成分比较单一的洗脱液后,再去做紫外扫描,就可以确定检测波长了。

    其实,如果只是想简单的归类合并洗脱液,TLC已经足够了。没必要做HPLC。当然,如果你还有别的检测目的的时候,可以多考虑别的仪器。但是前提还是要找到成分单一的洗脱液。

    geebzbz(geebzbz) 发表:是的,主要就是这个目的,想通过仪器来检测,尤其是如果想利用HPLC之类的分离方法时,如何设定检测波长?谢谢回复啦!

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  • geebzbz

    第7楼2012/07/05

    最简单、最省时的办法就是TLC。

    找到成分比较单一的洗脱液后,再去做紫外扫描,就可以确定检测波长了。

    其实,如果只是想简单的归类合并洗脱液,TLC已经足够了。没必要做HPLC。当然,如果你还有别的检测目的的时候,可以多考虑别的仪器。但是前提还是要找到成分单一的洗脱液。[/quote]

    目前,我也是准备用TLC来检测,合并组分;只是在想,对于这种未知的色素(或者扩大到未知的天然化合物),分离检测过程中,其波长通常都怎么确定下来的,因为是在分离过程话,其实是个混合物啊,这样波长怎么设定呢?

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  • fengmo4668

    第8楼2012/07/05

    目前,我也是准备用TLC来检测,合并组分;只是在想,对于这种未知的色素(或者扩大到未知的天然化合物),分离检测过程中,其波长通常都怎么确定下来的,因为是在分离过程话,其实是个混合物啊,这样波长怎么设定呢?[/quote]

    讲洗脱液多分几段,找纯物质的一段去做紫外吸收。
    如果浓度太低的话,可以考虑浓缩。
    浓缩时要不要特别保护,怎样保护,只能自己摸情况了。

    geebzbz(geebzbz) 发表:最简单、最省时的办法就是TLC。

    找到成分比较单一的洗脱液后,再去做紫外扫描,就可以确定检测波长了。

    其实,如果只是想简单的归类合并洗脱液,TLC已经足够了。没必要做HPLC。当然,如果你还有别的检测目的的时候,可以多考虑别的仪器。但是前提还是要找到成分单一的洗脱液。

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